Abstracte achtergrond
Vorige cross-sectionele studies hebben gesuggereerd dat de wijze van levering van de samenstelling van de orale microflora kunnen beïnvloeden. Het doel van deze prospectieve studie was om de speekselklieren kolonisatie vergelijken vaginaal geleverd kinderen met kinderen door de keizersnede (C-sectie) tijdens hun eerste 6 maanden van hun leven bezorgd.
Methods
De onderzoeksgroep bestond uit 149 achtereenvolgens ingeschreven zuigelingen, geleverd hetzij vaginaal (n
= 96) of door C-sectie (n
= 53), die als vrijwilliger na toestemming van hun ouders. Speeksel monsters werden verzameld binnen 2 dagen na de geboorte en vervolgens na 1, 3 en 6 maanden. Een speeksel monster van de moeders werd verkregen 6 maanden na de bevalling. De ouders werd gevraagd om een vragenlijst over sociaal-economische factoren, levensstijl, en de hygiëne te voltooien bij aanvang en gedurende de onderzoeksperiode. Alle monsters werden geanalyseerd met 13 vooraf bepaalde bacteriële sondes met behulp dambord DNA-DNA hybridisatie.
Resultaten
De groepen werden in evenwicht gehouden op de basislijn met betrekking tot alle relevante achtergrondinformatie factoren. Gram-positieve streptokokken (S. mitis, S. salivarius
) getoonde hoogste tellingen in beide groepen, maar een grotere diversiteit waargenomen in de vaginale weg groep. A. naeslundi, A. odontolytics, F. nucleatum Kopen en L. salivarius
werden pas ontdekt onder de vaginaal geleverd zuigelingen. De prevalentie van S. sanguinis, S. Gordoni, R. denticariosa en B. dentinum
verhoogd met de leeftijd in beide groepen, maar de prevalentie was significant lager in de C-sectie (p Restaurant & lt; 0,05). Er was een verband tussen de moeders en hun nakomelingen met betrekking tot de speekselklieren microbiële profiel.
Conclusie Ondernemingen De microbiële samenstelling in het speeksel verschilt door de wijze van levering gedurende de eerste zes maanden van het leven.
Sleutelwoorden
C -sectie Zuigelingen orale bacteriën Oral kolonisatie Speeksel Achtergrond
De mondelinge biofilm speelt een belangrijke rol in gezondheid en ziekte [1]. De samenstelling is zeer individueel en beïnvloed door factoren zoals genetica, dieet, leeftijd en hygiëne [2]. Volgens de hygiëne hypothese, de volgorde en timing van de blootstelling aan verschillende bacteriestammen vroeg in het leven lijken van belang te zijn voor de darm koloniseren [3]. De wijze van levering en staking van borstvoeding zijn geïdentificeerd als belangrijke factoren darmflora rijping [4], en dit lijkt ook voor de mondholte. Eerder onderzoek heeft aangetoond dat kinderen met een keizersnede (C-sectie) afgeleverd vertonen een verminderde microbiële diversiteit in het speeksel in vergelijking met vaginaal geleverd kinderen [5, 6]. Bovendien kan de orale microbiële profiel borstgevoede van formule-gevoede baby's [7] discrimineren. Langdurig klinisch belang van deze bevindingen is niet geheel duidelijk, maar een verminderde diversiteit in de ingewanden correleert met verhoogd risico op chronische ziekten zoals astma en allergie [8]. De informatie van de lagere diversiteit in C-coupes zuigelingen is echter voornamelijk afkomstig van cross-sectionele studies en weinig longitudinale gegevens beschikbaar zijn. Het doel van deze studie was om speekselmonsters van zuigelingen geboren met keizersnede doorgelicht de eerste zes maanden van het leven met betrekking tot bepaalde toets bacteriën. De resultaten werden vergeleken met een groep vaginaal kinderen en de nulhypothese is dat er geen verschillen zouden worden weergegeven tussen de groepen.
Methods
Studie ontwerp
Het onderzoek maakte gebruik van een prospectieve case-control design en was ethisch . door het Comité voor regionaal Ethics in Lund, Zweden (DNR 2012/483), die de bevoegdheid heeft om studies bij Halland Ziekenhuis te keuren heeft goedgekeurd
Studiegroep
het materiaal bestond uit 149 pasgeboren baby's afgeleverd hetzij vaginaal (V; n
= 96) of door C-sectie (CS; n
= 53). De deelnemers werden achtereenvolgens ingeschreven bij gezonde vrijwilligers die werden geboren in Halland Hospital, Halmstad, Zweden, tussen april en december 2013. Beide ouders een toestemmingsformulier ondertekend na een grondige mondelinge en schriftelijke informatie. Uitsluitingscriteria waren i) te vroeg geboren kinderen, ii) pasgeborenen met behoefte aan neonatale zorg, iii) kinderen met een onduidelijke medische aandoening, en iv) families die verhuizing in het buitenland gepland na de geboorte. De 6-maanden verloop bedroeg 20% en de drop-outs met betrekking tot de aangewezen follow-ups worden weergegeven in tabel 1 1.Table Deelnemers en drop-out frequentie in de twee groepen (CS = C-sectie; V = vaginale levering)
Age
CS
V
Total
uitval
Newborn (1-2 dagen )
53
95
148
-
1 maand
45
79
124
16%
3 maanden
44
74
118
20%
6 maanden
44
73
117
20%
Waarden in de tabel duiden aantal kinderen
speeksel bemonstering
Monsters van speeksel binnen 2 dagen na de geboorte werden verzameld en vervolgens na 1, 3 en 6 maanden met behulp van steriele wattenstaafjes. Bij de eerste gelegenheid, werden de ouders zorgvuldig geïnstrueerd en getoond hoe het monster te verzamelen en de overdracht van de top tot een duidelijke plastic buis. Op de aangewezen follow-ups, ontvingen de ouders van de testkit met een steriele met een wattenstaafje en een plastic buis met een geïllustreerd fiche via de gewone post. De ouders werd gevraagd om het monster in de ochtend verzamelen door het weken het wattenstaafje in speeksel en onmiddellijk terug naar het laboratorium. Indien een monster ontbrak, waren de ouders herinnerd via een telefoontje binnen 5 dagen. Op soortgelijke wijze, een speeksel monster van de moeder verkregen 6 maanden na de bevalling. Alle monsters werden bevroren opgeslagen totdat verdere analyses.
Microbiële methode
De monsters werden verwerkt met het dambord DNA-DNA-hybridisatie-technologie volgens de Wall-Manning et al. [9]. DNA werd geëxtraheerd met mutanolysine en lysozyme zoals eerder beschreven [10] en het DNA werd geëvalueerd kwaliteit van het UV-spectrum tussen 200 en 300 nm met behulp van een Gene Quant spectrofotometer (Pharmacia Biotech, Uppsala, Zweden). Hele genoom-DNA-probes van potentieel belang voor orale gezondheid en ziekte werden bereid uit een panel van 13 bacteriesoorten met stam-label volgens de kweekcollectie Oral Microbiologie, Göteborg, Zweden: Actinomyces odontolyticus
G67; Actinomyces naeslundii
2466 (A. oris
); Bifidobacterium dentium
G174; Fusobacterium nucleatum
2865; Lactobacillus casei
3184; Lactobacillus salivarius
3830; Rothia denticariosa
1956; Streptococcus gordonii
2471; Streptococcus mitis
1770; Streptococcus mutans
2482; Streptococcus salivarius
2473; Streptococcus sanguinis
2478; Veillonella parvula
G186. De bacteriële telling werd uitgevoerd door het percentage-werkwijze waarbij de intensiteit van het signaal (biomedische lichteenheden) uitgedrukt als een fractie van een hoge standaardmonster (10
6 cellen) met behulp van LumiImager Workstation (Boehringer Mannheim, Mannheim , Duitsland). De detectie niveau was & gt;. 10 4 cellen per ml monster
Vragenlijst
Bij het opnemen, werden de ouders gevraagd om een 20-punt vragenlijst over de familie kenmerken, socio-economie, leefstijlfactoren te voltooien en hygiënische gewoonten. Een verdere vragenlijst over de fokkerij, voeding, tandenpoetsen gewoontes en voorgeschreven antibiotica was verbonden aan de follow-up mailings en keerde samen met de monsters.
Statistische methoden Leer Alle gegevens werden verwerkt met de IBM SPSS-software (versie 22.0 , Chicago IL, USA). Verschillen in percentage uitkeringen tussen de groepen werden berekend met chi-kwadraat testen en correlaties tussen de bacteriële tellingen in moeders en hun nakomelingen werden uitgedrukt als Spearman correlatiecoëfficiënt. We hebben overwogen p
-waarden kleiner dan 0,05 als statistisch significant.
Resultaten
De groepen werden in evenwicht gehouden op de basislijn met betrekking tot alle relevante achtergrond factoren, met uitzondering van het water te breken (voor de exacte details, zie tabel 2). Het aandeel meisjes iets hoger in de doorlopende maar het verschil was niet statistisch significant. De zelf-gerapporteerde voeding routines en het gebruik van spenen zijn weergegeven in Tabel 3. Zuigelingenvoeding kwamen meer voor doorlopende opzichte van de V-groep tijdens de eerste 6 maanden, maar het verschil was niet statistisch significant. De frequentie van antibiotica aan de moeder tijdens de eerste zes maanden na levering was vergelijkbaar (& lt; 15%) in beide groepen. Het totale aantal cellen gedetecteerd uit de V monsters gemiddeld hoger was dan de monsters CS helemaal bemonstering gelegenheden: geboorte: 0,7 vs. 0.5x10 6; 1 maand: 1,3 versus 0.9x10 6; 3 maanden: 1,6 versus 0.9x10 6; 6 maanden: 1,5 versus 0.9x10 6 cellen. De prevalentie van de geselecteerde bacteriën wordt samengevat in Tabel 4. Een grotere diversiteit waargenomen in de V-groep. Bijvoorbeeld, A. naeslundi
, A. odontolytics
, F. nucleatum Kopen en L. salivarius
werden pas ontdekt onder de vaginaal geleverd zuigelingen. De prevalentie van S. sanguinis
, S. Gordoni
, R. denticariosa Kopen en B. dentinum
toe met de leeftijd in beide groepen, maar de prevalentie was significant lager in de CS-groep (p
& lt; 0,05). S. mitis Kopen en S. salivarius
verschijnt de hoogste tellingen in beide groepen op alle proeverijen, maar de graven waren niet geassocieerd met de wijze van levering. Er was een statistisch significante correlatie tussen de moeders en hun nakomelingen over het speeksel profiel zes maanden na de levering met betrekking tot vijf stammen in het doorlopende en acht stammen in de V-groep (Tabel 5) .table 2 Baseline gezinskenmerken in beide groepen (CS = C-sectie; V = vaginale bevalling)
Variabele
CS
V
Sex (meisjes /jongens)
57/43
44/56
Water break (ja)
29
100a
Mother geboren in Zweden (ja)
91
91
Mother's onderwijs, universitair (ja)
64
60
moeder roken (ja)
0
4
voorgeschreven antibiotica (moeder)
4
4
Broers en zussen (& gt; 2)
6
6
Waarden in de tabel duiden procent
astatistically significant verschil tussen de groepen (p Restaurant & lt.; 0,05, chi-kwadraat test)
Tabel 3 Zelf-gerapporteerde gegevens van de vragenlijsten 1, 3 en 6 maanden na vaginale bevalling (V) of C-sectie (CS)
Variabele
1 maand
3 maanden
6 maanden
CS /V
CS /V
CS /V
borstvoeding (ja)
89/95
71/84
55/69
zuigelingenvoeding (ja)
47/32
51/35
50/44
Geïntroduceerd food-proeven (ja)
0/0
0/4
72/83
Fopspeen (ja)
80/83
82/77
85/71
tanden aanwezig (ja)
0/0
2/0
30/32
Oral schoonmaak (ja)
0/0
9/3
30/26
Antibiotica (ja, baby)
0/3
0/1
0/1
Antibiotica ( ja, moeders)
9/5
5/4
0/3
Waarden in de tabel duiden procent
Table 4 Prevalentie (≥104 cellen) van de geselecteerde stammen bij de geboorte en aangegeven tijdstippen bij kinderen vaginaal (V) geleverd of met C-sectie (CS)
Strain
geboorte
1 maand
3 maanden
6 maanden
CS /V
CS /V
CS /V
CS /V
A. naeslundi
0/5
0/0
0/2
0/2
A. odontolyticus
0 /12a
0 /32a
0 /30a
0 /32a
B. dentinum
5 /32a
13 /61a
8 /49a
16 /63a
F. nucleatum
0/2
0/11
0 /10
0 /14a
L. casei
0/2
0/0
0 /0
0/0
L. salivarius
0/0
0/0
0/0
0/3
R. denticariosa
0 /12a
3 /22a
10/21
8 /39a
S. Gordoni
3 /15a
10/19
13 /32a
13 /38a
S. mitis
73/84
85/94
90/94
93/96
S. mutans
53 /76a
65 /88a
58 /88a
68 /92a
S. salivarius
28/36
45 /67a
53/71
48/70
S. sanguinis
0 /35a
5 /44a
10 /47a
13 /53a
V. parvula
0/0
3 /6
5/6
8/24
Waarden in de tabel duiden procent
astatistically significant verschil tussen de groepen (p
& lt; 0,05, chi-kwadraat test)
Tabel 5 Oral kolonisatie van geselecteerde bacteriën in moeders en hun baby's, 6 maanden na vaginale bevalling (V) of C-sectie (CS)
Strain
CS
V
A. naeslundi
NS
NS
A. odontolyticus
NS
0.43
B. dentinum
0.54
0.28
F. nucleatum
NS
NS
L. casei
NS
NS
L. denticariosa
NS
0.45
L. salivarius
NS
NS
S. gordonii
0,48
0.36
S. mitis
0.59
0.32
S. mutans
0.85
0.36
S. salivarius
0.71
0,48
S. sanguinis
NS
0.56
V. parvula
NS
NS
De waarden in tabel duiden Spearman twee- tailed correlatiecoëfficiënt. NS
geen statistisch significant
Bespreking De resultaten van deze relatief grote studie geven verdere steun aan eerdere bevindingen dat de samenstelling van de orale biofilm wordt beïnvloed door de wijze van levering [5, 6, 11] met een lagere diversiteit onder zuigelingen geleverd met C-sectie. Daarom kon de nulhypothese worden afgewezen. Onze resultaten moet echter rekening worden gehouden met enige voorzichtigheid om een aantal redenen. Allereerst kan de samenstelling van de vroege speekselklieren microbiota worden beïnvloed door een aantal andere dan de wijze van levering factoren, zoals peri-delivery behandeling met antibiotica, dieet [12], voedergewoonten [7, 13], gebruik van fopspenen [14], gezinsinkomen [11, 13], en tandenpoetsen gewoonten [15]. In onze studie, de CS en de vaginaal groepen waren vergelijkbaar met betrekking tot socio-economie, de grootte van het gezin, de moeder opleidingsniveau, en het voeden gedrag, zodat we rekening houden met de risico's voor confounders als klein. Zelfs het voorschrijven van antibiotica aan de moeders en hun off-veren was gelijk volgens de vragenlijsten, zij het een zekere onderrapportage kan worden vermoed. Ten tweede, het dambord DNA-DNA-hybridisatie techniek heeft zijn sterke en zwakke punten; Het belangrijkste voordeel is dat de werkwijze toelaat opsomming van grote aantallen soorten in grote aantallen monsters en dus beschouwd als een nuttig instrument voor de bepaling van bacteriële species in complexe microbiële systemen [16]. Onder de beperkingen werden mogelijke kruisreacties en variërende reproduceerbaarheid voor verschillende stammen besproken [17]. Ten derde is het mogelijk dat de bemonsteringsprocedure een grotere variabiliteit in resultaten dan het laboratorium procedure als zodanig hebben veroorzaakt. Deze tekortkomingen, samen met de relatief hoge detectiegrens maakte ons het bacteriële quantificeren volgens het percentage werkwijze als de meest betrouwbare alternatief [17]. Het is echter belangrijk te benadrukken dat de prevalentie waarden gemeld hier was gebaseerd op een drempelwaarde van ongeveer 10 4 cellen; de geselecteerde stammen zou heel goed in het monster, maar niet in voldoende hoeveelheden te worden gedetecteerd. Zo zou de volgende logische stap dus om het in kaart brengen uit te breiden tot het hele mondelinge microbiome bevatten. Een vierde mogelijke vertekening was de relatief hoge uitval in de loop van de studie, en we kunnen alleen maar speculeren over de mogelijke invloed op de resultaten. Ondernemingen De intra-familie correlatie van de orale microflora met speciale aandacht voor moeder en kind en mutans streptococcen overname is al meerdere malen eerder beschreven [18-21]. Interessant is dat Ruiz-Rodriguez en medewerkers [22] niet in geslaagd een moeder-kind relatie voor S. mutans hotels met conventionele kweken demonstreren, maar hun steekproef was klein en S. mutans
werd zeer zelden waargenomen (2%) onder de zuigelingen met een leeftijd van 150 dagen. In de huidige studie, de meerderheid van alle kinderen in de CS-groep en bijna allemaal in de V-groep koesterde S. mutans
op leeftijd van 6 maanden en afgezien van de verschillende bemonstering en analytische technieken, hebben we geen verklaring voor deze tegengestelde bevindingen. Toch is de duidelijke moeder-kind relatie voor 8 van de 13 vlekken in de V-groep was interessant, maar moet verder worden onderzocht met bijvoorbeeld 16 s rDNA amplificatie en sequencing. Ondernemingen De vraag voor hoe lang een delivery-afhankelijke verschil in orale kolonisatie heerst, en of dit tandheelkundige gezondheid van invloed kunnen zijn op latere leeftijd, blijft open. Er is echter reële aanwijzingen dat een vroegtijdige verwerving van orale mutans streptokokken in het algemeen wordt geassocieerd met een verhoogd risico op cariës ontwikkeling [23, 24]. Verder zijn er rapporten suggereren dat kinderen geleverd keizersnede hebben een verhoogd risico voor astma kinderen [25] en cariës op de leeftijd van 3-5 jaar [26, 27]. Deze mogelijke relatie moet echter worden geverifieerd in grotere instellingen en in prospectieve studies met betrekking tot de jonge permanente gebit.
Conclusies
Binnen de beperkingen van de huidige studie werd geconcludeerd dat de wijze van levering speelt een rol in de samenstelling van de orale biofilm gedurende de eerste 6 maanden van het leven. Vaginaal kinderen lijken een grotere diversiteit dan C-gedeelte voor kinderen en een nauwere gelijkenis met hun moeder hebben. Verdere studies naar een mogelijke lange termijn invloed op de mondgezondheid te onderzoeken lijken gerechtvaardigd
Afkorting
CS:.
Keizersnede
verklaringen
Dankwoord
het project werd ondersteund door een subsidie van de Regio Halland, Zweden. De auteurs willen graag de medewerkers bedanken de moederlijke kliniek op het Halland ziekenhuis en alle ouders voor hun vertrouwen en geduld. Wijlen mevrouw Kerstin Magnusson (RDH) is erkend voor haar geschoolde technische bijstand
Open AccessThis artikel wordt gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution 4.0 International License (http:.. //Creativecommons org /licenties /by /4. 0 /), die het mogelijk maakt onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elke vorm, mits je de juiste krediet te geven aan de oorspronkelijke auteur (s) en de bron, een link naar de Creative Commons licentie, en aangeven of wijzigingen zijn aangebracht. De Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creativecommons org /publicdomain /zero /1 0 /) van toepassing op de ter beschikking gestelde in dit artikel, tenzij anders vermeld data
Competing. belangen
de auteurs hebben geen belangenconflicten te verklaren
auteurs bijdragen
KB:. alle gegevens verzameld, uitgevoerd statistische analyses en schreef het eerste ontwerp. JR: ontwierp de studie, en afgerond het manuscript. GD: voerde de microbiologische analyses en schreef het manuscript. JD: ontworpen en begeleid de studie en afgerond het manuscript. ST: ontwierp de studie, uitgevoerd statistische analyses en schreef het eerste ontwerp. Alle auteurs hebben gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.
