Abstracte achtergrond
Oral plaveiselcelcarcinoom (OSCC) is geassocieerd met een slechte 5-jaarsoverleving. Over het algemeen patiënten met kleine tumoren een vrij goede prognose, maar sommige kleine tumoren agressief gedrag leidt tot vroege dood. Er zijn op dit moment geen betrouwbare voorspellende biomarkers voor orale kankers. Aldus behandeling optimaliseren voor de individuele patiënt, is er een behoefte aan biomarkers die tumor gedrag kan voorspellen.
Methode In dit onderzoek potentiële prognostische waarde van plectine werd geëvalueerd door een tissue microarray (TMA) gebaseerd immunohistochemische analyse van primaire tumorweefsel verkregen van een Noord Noorse cohort van 115 patiënten met OSCC. De expressie van plectine werd vergeleken met klinische en pathologische variabelen en 5 jaars overleving.
Resultaten
De statistische analyse bleek dat lage expressie van plectine in de tumorcellen voorspelde een gunstige uitkomst voor patiënten met niet-gemetastaseerde ziekte (p
= 0,008). Verder is de expressie van plectine bleek te correleren (p
= 0,01) met de expressie van uPAR die we eerder hebben gevonden dat een potentiële prognostische marker voor T1N0 tumoren.
Conclusies Home Onze resultaten geven aan dat lage expressie van plectine voorspelt een gunstig resultaat voor patiënten met niet-metastatische OSCC en het expressieniveau van plectine kan derhalve worden gebruikt bij de behandeling stratificatie van patiënten met een vroeg stadium van de ziekte. achtergrond
plaveiselcelcarcinoom (SCC) accounts meer dan 90% van de kwaadaardige neoplasma's van het hoofd-halsgebied [1, 2]. Hoofd en nek SCC (HNSCC) hebben een 5-jaarsoverleving van ongeveer 50%, [3, 4] en worden gerangschikt als de achtste belangrijkste oorzaak van kanker overlijden wereldwijd [5].
OSCC omvat tumoren gelegen in de mobiele tong, mondbodem, mondslijmvlies, gingivale rand en de harde en zachte gehemelte. De meest gebruikte classificatie-systeem van OSCC is de TNM-systeem door de Unie voor Internationale Kanker Controle [6]. Dit systeem wordt gebruikt om de anatomische omvang van de ziekte te beschrijven bij diagnose gebaseerd op primaire tumorgrootte en omvang van tumorgroei (T), regionale lymfeklier (N) en metastasen (M), en is de basis voor fase groeperen van deze patiënten [7, 8]. Door morfologische evaluatie, worden tumoren en gesorteerd, matig en slecht gedifferentieerde [1]. De TNM-classificatie, en in mindere mate de graad van differentiatie, worden vaak gebruikt als voorspellers uitkomst. Echter, OSCCs zijn moleculair heterogene en tumoren met identieke TNM-classificatie en differentiatie graad kunnen verschillen in agressiviteit en de respons op de behandeling [7, 9]. Deze onvoorspelbaar gedrag verhoogt de behoefte aan een diagnostisch instrument dat betrouwbaardere prognostische informatie kunnen verstrekken.
Een risicomodel gebaseerd op histologisch onderzoek van de tumoren voorgesteld [10-12]. In een recente studie dit model niet het resultaat van patiënten met tong SCC [13] voorspellen. Verscheidene eerdere rapporten hebben verschillende biomarkers, zoals p53, EGFR, Ki67 en E-cadherine als prognostische markers voor OSCC, voorgesteld [14-16] hoewel geen zijn in de klinische praktijk is gebracht. In een poging om nieuwe en betere prognostische markers wij in deze studie gericht op plectine plectine voorbeeld een grote intracellulaire cytoskelet linker eiwitten (& gt; 500 kDa) dat belangrijk gebleken in cytoskelet netwerk organisatie. Het wordt uitgedrukt in normale huid en in de epitheliale bekleding van het maag-darmkanaal, spiercellen en endotheelcellen van de vaten, [17] en in kanker die in de slokdarm, maag, longen, pancreas en de mondholte [17, 18]. Plectine is gelokaliseerd aan de binnenkant van het plasmamembraan waar het wordt geassocieerd met intermediaire filamenten (IF), microtubuli en microfilamenten [19]. In hemidesmosomen, plectine samenwerkt met de cytoplasmatische staart van de integrine β4 subunit. Defecten in de plectine gen gevonden in de zware, erfelijke, blaarvorming erfelijke ziekte epidermolysis bullosa simplex, benadrukt het belang van het eiwit in normale epitheelcellen [20]. Plectine beïnvloedt mechanische en dynamische eigenschappen van het cytoskelet en (althans in keratinocyten) plectine-deficiëntie is te leiden tot een verhoogde migratiesnelheden waarschijnlijk via activering van de Erk1 /2 pathway [21]. In een onderzoek naar HNSCC, Katada et al. gevonden dat de overleving van patiënten met hoge plectine expressie in de kankercellen significant was verminderd, en de frequentie van recidieven aanzienlijk toegenomen, vergeleken met patiënten met lage plectine expressie [22].
In een recente studie hebben we aangetoond dat de urokinase plasminogeen activator receptor (uPAR) en plasminogeen activator inhibitor-1 (PAI-1) kan prognostische markers in jonge OSCC [23]. uPAR is een bestanddeel van de plasminogeen activator (PA) -systeem, en beide urokinase plasminogeen activator (uPA) en uPAR zijn gekoppeld aan verhoogde proteolytische activiteit en migratie van kankercellen. uPA plasminogeen omgezet in het actieve serineprotease plasmine, een breedspectrum protease dat veel verschillende extracellulaire matrix kunnen afbreken naast latente groeifactoren en matrixmetalloproteasen [24, 25] te activeren. Door binding van uPA aan uPAR kan kankercellen de proteolytische activiteit aan het celoppervlak [26] direct. Net als bij plectine, is de verhoogde expressie van uPAR in verband gebracht met het fenomeen epitheliale-mesenchymale transitie (EMT) [27-29].
In deze TMA-gebaseerde studie, werd lage expressie van plectine gevonden om een marker voor een zijn gunstige prognose in niet-uitgezaaide OSCC. Plectine en uPAR toonde vergelijkbare kleurpatronen in de tumoren en er was een significante correlatie tussen plectine en uPAR expressie.
Methods
Exemplaren
Dit was een retrospectieve studie gebruikt formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde tumormonsters van 115 patiënten met histologisch geverifieerd primaire OSCC in de periode 1986-2002 verzameld uit de archieven van de afdeling Klinische Pathologie, Universitair Ziekenhuis van Noord-Noorwegen. Om een homogeen cohort verzekeren, werden tumoren met verruceuze groeipatronen en tumoren van patiënten met kanker, of voor radiotherapie van het hoofd en nek uitgesloten. Alle patiënten hadden onderliggende ziekte in de mondholte zoals mobiele tong, mondbodem, buccale mucosa, tandvlees en harde en zachte gehemelte. Relevante klinische gegevens en TNM-classificatie werden opgehaald uit dossiers van patiënten, met inbegrip van pathologie rapporten, statistieken van Noorwegen en de doodsoorzaak Registry. De N en M statussen werden bepaald door klinische en radiologische onderzoek. De normale tong mucosa weefsel werd verkregen uit weefsel grenzend aan het tumorweefsel. Het onderzoek werd goedgekeurd door de regionale comités voor Medische en Health Research Ethics, Noord-Noorwegen (nr 22/2007). De patiënt informatie werd de-geïdentificeerd voorafgaand aan de analyse. De ethische commissie achtte het niet nodig om schriftelijke of mondelinge toestemming van de deelnemende patiënten.
Tissue microarray (TMA)
Een morfologisch representatieve gebied van elke tumor werd geïdentificeerd op een hematoxyline en eosine (HE) -stained glijbaan, en kernen voor de TMA werden geoogst uit de overeenkomstige weefsel blok met behulp van een Beecher Instruments Micro tissue Arrayer. Acht kernen van 0,6 mm werden uit de geselecteerde gebieden van het geverblok van elke tumor en in paraffine microarray ontvangende blokken geplaatst. Vier pm dikke secties van de vaste, paraffine ingebedde TMA weefsel werd gesneden met een microtoom en geplaatst op Superfrost dia's. HE-kleuring en immunohistochemische cytokeratine-kleuring werd uitgevoerd om de aanwezigheid van tumorweefsel verifiëren.
We ervoeren een verlies van 16,5% van de kernen tijdens de bereiding, en de bewaarde kernen, 8,4% bevatte te weinig tumorcellen te evalueren . Dit verlies vanwege technische problemen matig in vergelijking met andere rapporten [30, 31]. Van elke patiënt een gemiddeld aantal van 3,82 cores gekleurd en beoordeeld op plectine expressie.
Beoordeeld op basis van elke patiënt was 3,82.
Immunohistochemie (IHC) Leer Alle dia's werden deparaffinised en gehydrateerd. De plectine antigen retrieval was door koken in een druksysteem met 10 mM citraatbuffer (pH 7,0). Verder werden de objectglaasjes geïncubeerd 30 min met 3% H
2O 2 endogene peroxidase activiteit te blokkeren, en gedurende één uur met 10% geit serum (Dako, Glostrup, Denemarken) in fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) ( Dako, Glostrup, Denemarken) om niet-specifieke kleuring te verminderen. Konijn primair monoklonaal antilichaam tegen plectine (ab32528, Abcam, Cambridge, MA) werd verdund 1: 200 in Dako antilichaamverdunningsmiddel (S3022, Dako, Glostrup, Denemarken), en overnacht geïncubeerd bij 4 ° C. Vervolgens werden gebonden antilichamen zichtbaar gemaakt met behulp van de anti-konijn Envision Plus System (K4011, Dako, Glostrup, Denemarken). De glaasjes werden gewassen in PBS w /0,1% Tween-20 met een hoge concentratie zout (0,4 M NaCl) en pH 6,0 (PBSTS6) na incubatie met primaire en secundaire antilichamen. Ondernemingen De anti-plectine antilichaam (ab32528 ) is eerder beschreven en gevalideerd als een goede marker voor pancreas adenocarcinoom [18]. Als een negatieve controle werd pancreascarcinoom weefsel behandeld volgens dezelfde kleuringsprotocol, maar het primaire antilichaam weggelaten. Geen kleuring werd waargenomen wat aangeeft dat de secondaire antilichaam gaven geen niet-specifieke kleuring in het weefsel (gegevens niet getoond).
Kleuring van normale orale mucosa vertoonden specifieke en sterke kleuring van spierweefsel in bloedvaten, die als positieve controle.
de uPAR kleuring werd uitgevoerd volgens de vorige beschrijft protocollen [23].
Immunohistochemische scoren Leer Alle kernen werden onderzocht door een ervaren patholoog (SES) en een getrainde hoofd en nek chirurg (OR) zonder kennis van de klinische uitkomst. Het scoren werd semi-kwantitatief, [32, 33] en de kleuring index (SI) berekend als een product van kleurintensiteit (none (0), zwak (1), matig (2) of sterke (3)) en percentage positieve tumorcellen (geen kleuring (0), & lt; 10% (1), 10-50% (2), 51-80% (3) of & gt; 80% (4)). Dus de SI voor elk monster verschilt van een minimum waarde van nul tot een maximum van 12, en eindstand van de patiënt was de gemiddelde SI van de monsters beoordeeld. Tumoren met een score boven de mediaan werden geclassificeerd als hoog expressoren ', terwijl die met een score onder mediaanwaarde werden geclassificeerd als het hebben van een lage expressie van de biomarker.
Immunofluorescentie (IF)
Voor IF analyse van de dia's werden voorbehandeld als beschreven in het protocol voor IHC plectine. Een konijn polyklonaal anti-plectine antilichaam (ab83497, Abcam, Cambridge, MA) aanbevolen voor IF werd gebruikt. Het antilichaam werd verdund 1:10 in Dako antilichaamverdunningsmiddel (S3022, Dako, Glostrup, Denemarken) en gedurende 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Nadat de objectglaasjes werden gewassen met PBSTS6 werden ze overnacht geïncubeerd bij 4 ° C met de muis monoklonaal anti-humaan uPAR antilichaam (# 3936, Sekisui Diagnostica, Stamford, CT, VS) bij een 1:10 verdunning in een buffer van 10 % geitenserum (Dako Noord Amerika, Carpintera, CA, USA) in PBS met 1% BSA en 0,3% Tween-20, pH 6,0. Na incubatie werden de glaasjes gewassen met PBSTS6. De secundaire antilichamen (Alexa Fluor 488, geit anti-konijn, A11034 en Alexa Fluor 647, geit-anti muis, A21236, Invitrogen, Carlsbad, CA) werden gemengd en verdund 1: 200 in PBS. De dia's werden gemonteerd en tegengekleurd met DAPI antifade (DAPI in Fluorgard, 0,5 g /ml, Insitus, Albuquerque, NM) en verzegeld met nagellak. De objectglaasjes werden geobserveerd en gefotografeerd met behulp van Leica TCS SP5 confocale laser microscoop Leica Application Suite software Gevorderde fluorescentie (Leica Microsystems AG, Wetzlar, Duitsland). Ondernemingen De specificiteit van de polyklonale anti-plectine antilichaam (ab83497) van de immunofluorescentie kleuring werd getest door kleuring pancreas adenocarcinoom. Vergelijkbaar met het monoklonale anti-plectine antilichaam, het polyklonale anti-plectine antilichaam specifiek gekleurde pancreatische kankercellen. Bovendien Western blotting van alle spieren cellysaat toonden dat het antilichaam gaf een band van ongeveer 500 kDa die overeenkomt met de grootte van plectine (gegevens niet getoond). Statistische gegevens
Alle gegevens werden getabelleerd en geanalyseerd met de IMB SPSS Statistieken (Chicago, IL), versie 21. Verenigingen tussen verschillende categorische variabelen werden beoordeeld door de Pearson`s chikwadraattoets. Univariate analyses van de invloed van de verschillende variabelen 'op tijd tot ziekteprogressie overleving werden uitgevoerd met behulp van de Kaplan-Meier-methode en statistische significantie tussen de categorieën werd geschat door de log-rank test. Statistisch significante waarden van COX univariate analyses werden in een multivariate analyse met behulp van de achterwaartse stapsgewijze Cox regressiemodel ingevoerd. Ziektespecifieke dood (DSD) werd gedefinieerd als patiënten sterven vorm OSCC en niet die van niet-verbonden voorwaarden. Deze gegevens werden verkregen uit de "Doodsoorzaak register in Noorwegen. Correlatie tussen bivariates werd berekend met rho Spearman's. De cut-off voor lage en hoge expressie voor elke biomarker werd ingesteld op de mediaan van de uiteindelijke score van de patiënt, en was 5,60 voor plectine en 5,63 voor uPAR. Alle resultaten waren significant als p Restaurant & lt beschouwd; 0,05, en gerapporteerd in overeenstemming met de opmerking richtlijnen van McShane et al. [34] Het startpunt werd gedefinieerd als de tijd van de diagnose, en de laatste dag van de follow up was 1 januari st, 2012.
Resultaten
In de huidige studie de prognostische waarde van plectine in OSCC werd geëvalueerd door een TMA-gebaseerde immunohistochemische analyse van primaire tumorweefsel verkregen van een Noord Noorse cohort van 115 patiënten. De cohort bestond uit 64 mannen en 51 vrouwen, met een gemiddelde leeftijd van 65,2 jaar (mannen 64,4 /vrouwen 66,0) bij diagnose [23]. De meerderheid van de aangeboden met kleine tumoren (T1, T2 of 34%, 37%) geen lymfekliermetastase (N0, 63%) en een goed tot matig gedifferentieerde tumoren (90%) gevallen. Zoals verwacht, tumorgrootte (T) en de aanwezigheid van lymfekliermetastase (N +) significant gecorreleerd met ziektespecifieke dood (DSD), terwijl de graad van differentiatie niet Immunohistologische kleurpatroon.
Plectine nauwelijks gekleurd normale tong mucosa die als controlemateriaal, terwijl de bloedvaten in de onderliggende stroma weergegeven sterkere kleuring (Fig. 1a). In plectine-positieve tumoren OSSC de kleuring relatief homogeen gehele tumor (fig. 1b). De kankercellen waren zeer positief terwijl de aangrenzende extracellulaire matrix vertoonden minder reactiviteit. De kleuring van de kankercellen was voornamelijk beperkt tot de plasmamembraan (fig. 2), maar cytoplasmatische kleuring werd ook waargenomen in een relatief groot deel van de kernen. Fig. 1 Immunohistochemische kleuring voor plectine normale mucosa tong (a) en orale plaveiselcelcarcinoom (b). De normale slijmvlies toonde slechts vage vlekken, terwijl de bloedvaten in de stroma sterk werden gekleurd. De kleuring van plectine positieve tumorcellen was sterk en de stroma liet bijna geen vlekken
Fig. 2 Immunhistochemical kleuringspatroon in TMA kernen van orale plaveiselcelcarcinoom. Plectine kleuring was voornamelijk op de plasmamembraan, maar ook sommige cytoplasmatische kleuring waargenomen
Survival
Bij patiënten zonder lymfeklier (N0) in elk T-fase, de kans op overlijden van de ziekte binnen 5 jaar was significant verminderd bij patiënten met lage plectine expressie tumoren ten opzichte van die met hoge plectine expressie (p = 0,008
) (Tabel 1 en figuur 3). Ook voor de patiënten met een T1-tumoren, onafhankelijk van de N-status, statistische analyses bleek een aanzienlijk verminderd risico op DSD bij degenen die tumoren hadden met lage plectine expressie (p
= 0.031). Zoals verwacht, gezien het voorgaande resultaten, patiënten met T1N0 tumoren met lage plectine meningsuiting had een uitstekend resultaat als al deze patiënten na 5 jaar (p Restaurant & lt; 0,001) nog in leven waren. In een multivariate analyse van de N0-cases inclusief plectine en grootte van de tumor (T1 vs T2-4), was alleen hoge plectine expressie een belangrijke onafhankelijke voorspeller van verhoogde DSD (p = 0,014
, HR 3,674, CI 95% 1.305- 10,344) .table 1 Expressie van plectine in de gehele cohort, de N0, T1 en T1N0 patiënten op het moment van de diagnose. Het aantal patiënten met een 5 jaar ziekte specifieke sterfte (DSD) wordt gegeven in aantallen en als percentage van de totale in elke groep van de in totaal in elke groep
plectine
Lage expressie Gids hoge expressie
DSDP
Alle patientsa
N (% van het totaal)
55
56
5-jaar DSD
19 (35%)
25 (45%)
0,198
N0-casesb
N (% van het totaal)
36
32
5-jaar DSD
5 (14%)
13 (41%)
0.008 *
T1 -casesc
N (% van het totaal)
23
16
5-jaar DSD
2 (9%)
6 (38%)
0,031 *
T1N0-casesd
N (% van het totaal)
19
9
5-jaar DSD
0
4 (44%)
& lt; 0,001 *
totaalVitamine aantal patiënten opgenomen in de analyse was 111
btotal aantal patiënten opgenomen in de analyse werd 68
ctotal aantal patiënten in de analyse opgenomen werd 39
dtotal aantal patiënten opgenomen in de analyse was 28
* p
& lt; 0,05 werd beschouwd als statistisch significant en gemarkeerd boldsface indien aanwezig
Fig. 3 Kaplan-Meier plot. De figuur toont het verschil in overleving bij N0-patiënten met hoge en lage expressie van plectine respectievelijk
Correlatie van plectine en uPAR meningsuiting
We hebben onlangs aangetoond dat patiënten met T1N0 tumoren uiting van lage niveaus van uPAR hebben een aanzienlijk verminderd DSD vergeleken met een grotere uPAR expressie. Om de verdeling van de expressie van uPAR en plectine in de tumoren te onderzoeken hebben we een chi-kwadraat test, en vond dat een aanzienlijk aantal van de tumoren die waren hoog expressoren van uPAR waren ook hoog expressoren van plectine, en mensen met een lage expressie van uPAR over het algemeen laag waren expressoren van plectine. Deze correlatie was significant met een correlatie coëfficiënt van 0,769 (p
= 0,01), zoals in een scatterplot in Fig. 4. Dubbele immunofluorescentie kleuring werd uitgevoerd op een aantal geselecteerde tumoren te onderzoeken of plectine en uPAR werden gestationeerd in dezelfde cellen samen tot expressie gebracht door dezelfde cellen, of zich aan dezelfde tumor gebieden. De immunofluorescentie bleek dat de plectine en uPAR kleuring was gelokaliseerd aan dezelfde gebieden van de tumor (Afb. 5). Zoals verwacht, de immunofluorescentie kleuring bevestigd dat plectine hoofdzakelijk is gevonden op plasmamembraan terwijl uPAR hoofdzakelijk gelokaliseerd in het cytoplasma. Fig. 4 Scatter plot van uPAR en plectine score voor de hele cohort. Er was een significante correlatie (p
= 0,01) tussen de plectine en de uPAR score. De lichtgrijze lijnen in de figuur vertegenwoordigen de 95% betrouwbaarheidsinterval
Fig. 5 Immunofluorescentiekleuring van orale plaveiselcelcarcinoom weefsel. De meerderheid van de cellen waren positief voor zowel plectine en uPAR. Plectine (groen) zich voornamelijk op het plasmamembraan en de omtrek van de cel, terwijl uPAR (rood) is prominent in het cytoplasmatische deel van de cellen. Plectine is sterk tot uiting in de wand van de bloedvaten (asterix
)
Discussie
Chirurgie is de primaire behandeling voor kanker in de mondholte, en wordt vaak gecombineerd met radiotherapie, terwijl chemotherapie wordt vaker toegepast als palliatieve behandeling in de late fase van de behandeling [35-37]. Neveneffecten van de behandeling van orale kanker kan verwoestende voor de levenskwaliteit van de patiënt, [38], en daarom is het belangrijk om schadelijke overbehandeling met radiotherapie bij patiënten met kleine tumoren met goede prognose voorkomen. Beslissingen over de omvang van de behandeling van patiënten met een vroeg stadium OSCC vaak moeilijk. Toch is de keuze van de behandeling voornamelijk gebaseerd op TNM-stadium die geen onderscheid tussen agressieve en indolente tumoren. Verschillende studies over de mogelijke biomarkers voor de behandeling stratificatie hebben aangetoond veelbelovende resultaten, maar tot nu toe geen dergelijke biomarkers zijn in de klinische praktijk is gebracht. In de huidige studie hebben we onderzoek gedaan naar de mogelijke rol van plectine als een prognostische biomarker. Voor zover wij weten, de prognostische waarde van plectine in OSCCs eerder alleen onderzocht door Katada et al. Zij onderzocht een cohort van 62 HNSCC, waaronder 23 van de mondholte [22]. Hoewel de cohort klein en heterogeen was, vonden zij dat de overleving significant was verminderd bij de tumor cellen brachten hoge niveaus van plectine. Ons cohort groter en alleen uit tumoren van de mondholte en dus homogener. Overeenkomstig de resultaten van Katada et al., Vonden we dat lage expressie van plectine in de tumorcellen voorspelt een gunstig resultaat, maar alleen in patiënten met een vroeg stadium van de ziekte.
We hebben eerder gevonden dat lage expressie van uPAR gecorreleerd met verminderde DSD OSCC voor patiënten met tumoren T1N0 en dat uPAR kan daarom een geschikte prognostische marker voor deze subgroep van patiënten [23]. In de huidige studie vonden we een zeer significante correlatie tussen de expressie van plectine en uPAR. In tegenstelling tot uPAR, hoge expressie van plectine significant gecorreleerd met DSD alle patiënten met niet-metastatische ziekte, en niet alleen de T1N0 subgroep.
Meeste tumorcellen die plectine expressie drukte ook uPAR. Eerder is gesuggereerd dat verhoogde expressie van uPAR in tumorcellen is geassocieerd met EMT [27, 29, 39]. Er is weinig bekend over plectine en EMT, maar de vorming van plectine bevatten podosomen is voorgesteld als een eerste stap in de richting van EMT in OSCC [40].
Conclusie
De huidige studie heeft aangetoond dat lage expressie van plectine voorspellen een gunstige uitkomst voor patiënten met niet-metastatische ziekte. Bovendien zijn alle patiënten met de ziekte T1N0 en lage expressie van plectine, overleefde meer dan 5 jaar. Hoewel de resultaten moeten worden gevalideerd in grotere cohorten, stel ze plectine als een veelbelovende prognostische biomarker, die kunnen worden gebruikt voor de behandeling stratificatie gids voor patiënten met niet-uitgezaaide OSCC
Afkortingen
DSD:.
Ziektespecifieke dood
EMT.
-mesenchymale transitie
HNSCC:
Hoofd en nek plaveiselcelcarcinoom
OSCC:
Oral plaveiselcelcarcinoom
TMA:
Tissue microarray
TNM:
urokinase plasminogeenactivator-receptor
classificatie systeem om de omvang van de primaire tumor regionale lymfekliermetastasen en verre metastase
uPAR evalueren > verklaringen
Dankwoord
Wij danken Bente Mortensen, Eli Berg en Magnus Persson voor een uitstekende technische bijstand en Inger Sperstad voor hulp bij het ontwerpen van de database. Daarnaast bedanken we Bodil Fadnes voor hulp bij immunofluorescentiekleuring en technische kwesties. Dit werk werd ondersteund De Noord-Noorse Regional Health Authorities en UiT De Artic Universiteit van Noorwegen, beide non-profit organisaties
Open Access Dit artikel wordt verspreid onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution 4.0 International License (http:. //creativecommons. org /licenties /door /4. 0 /), die het mogelijk maakt onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elke vorm, mits je de juiste krediet te geven aan de oorspronkelijke auteur (s) en de bron, een link naar de Creative Commons-licentie, en aangeven of wijzigingen zijn aangebracht. De Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creativecommons org /publicdomain /zero /1 0 /) van toepassing op de ter beschikking gestelde in dit artikel, tenzij anders vermeld data
Competing. belangen Ondernemingen de auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen. bijdragen
Authors '
OGR verzamelde het materiaal, uitgevoerd immunohistochemische en immunofluorescentie kleuring, geïnterpreteerd data, uitgevoerd statistische analyse, en stelde het manuscript. SNM uitgevoerd immunohistochemische kleuring, geïnterpreteerd gegevens en de opstellers van het manuscript. GS en EHO deelgenomen aan de opzet van het onderzoek, heeft bijgedragen aan de interpretatie van de gegevens, en kritisch herzien van het manuscript. LUH bedacht de opzet van het onderzoek, heeft bijgedragen aan de interpretatie van de gegevens, en kritisch herzien van het manuscript. SES deelgenomen aan de opzet van het onderzoek, heeft bijgedragen aan de interpretatie van de gegevens, uitgevoerd statistische analyse, en herzag het manuscript kritisch. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.
