Abstracte achtergrond
Matrix metalloproteïnasen (MMP's) af te breken de extracellulaire matrix (ECM) en reguleren remodeling en regeneratie van het bot. Glazuurmatrixeiwitten derivaat (EMD) proteïne is klinisch gebruikt voor parodontale regeneratie, hoewel de moleculaire mechanismen onduidelijk. We evalueerden de rol van matrix metalloproteinases (MMPs) in het reguleren EMD-afhankelijke afbraak van gelatine op oeoblast cellijn MG63.
Methods
MG-63-cellen (osteoblast cellijn) werden geïncubeerd met 100 ug /ml EMD eiwit in aanwezigheid of afwezigheid van MMP-2 weefselremmer 20 uur gevolgd door incubatie op DQ-gelatine beklede platen gedurende 4 uur. MG-63-cellen (1 x 10
6) gepreïncubeerd met SB203580 gedurende 30 minuten bij 37 ° C en werden daarna in 100 ug /ml EMD eiwit geplaatst voor 24 uur. Geconditioneerde media werden verzameld en gedetecteerd door Western blotanalyse.
Resultaten
EMD eiwitrijke celgemedieerde afbraak van gelatine, dat werd geremd door de MMP inhibitor TIMP-2. Bovendien MMP-2 werd geproduceerd door MG63 cellen in reactie op EMD eiwit in een P38 MAPK-afhankelijke wijze. Bovendien blokkeren van p38 MAPK activatie door SB203580 significant remde vorming van de actieve vorm van MMP-2.
Conclusie
p38 MAPK route bevordert expressie van MMP-2 in EMD geactiveerde osteoblasten, die op zijn beurt stimuleert parodontale regeneratie door afbreken . matrix eiwitten in parodontale bindweefsel
Electronic aanvullend materiaal
De online versie van dit artikel (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-85) bevat aanvullend materiaal, dat beschikbaar is voor geautoriseerde gebruikers is. achtergrond
Twee belangrijke doelstellingen van parodontale therapie regenereren van het parodontale ligament (PDL) en de wederopbouw van alveolaire bot verloren gaan als gevolg van parodontitis. Voorgaande experimentele modellen en klinische studies hebben aangetoond dat emaille-matrix afgeleid (EMD) proteïne bevordert generatie PDL, wortel cement en alveolaire bot [1-3]. EMD eiwit activeert ook osteoblasten cellen in vitro, wat leidt tot een wondgenezingsreactie [4] en het genereren van alkalische fosfatase [5]. Bovendien EMD eiwit reguleert de productie van matrix metalloproteïnasen (MMPs) en weefsel inhibitoren van MMP's (TIMP's) in creviculaire vloeistof [6, 7] is.
Bone continu vernieuwd, en de hoeveelheid nieuw bot afhankelijk van de balans tussen vorming en botafbraak, die worden gemedieerd door osteoblasten, osteoclasten en osteocyten. Verstoord extracellulaire matrix (ECM) omzet leidt tot botverlies en daarmee samenhangende aandoeningen, zoals periodontitis. Osteoblasten van bot remodellering cellen die differentiëren van mesenchymale stamcellen en scheiden ECM eiwit, dat vervolgens gemineraliseerd door osteoblasten. MMP's zijn zink-afhankelijke atoom endopeptidasen die een primaire rol in de afbraak van ECM eiwitten [8] spelen. Osteoblasten en osteocyten produceren ook MMP's zoals MMP-2 en MMP-13 [7, 9]. De functie van MMP-2 is ECM-eiwitten af te breken en te bevorderen remodeling en regeneratie van botweefsel [10].
Mitogeen-geactiveerde proteïnekinasen (MAPK's) zijn belangrijk signaal transducerende enzymen betrokken bij cellulaire regulatie. Recente studies onder toepassing van een p38 mitogen geactiveerd eiwitkinase (MAPK p38) remmer bleek dat cytokine stimulering van MMP-2 is betrokken bij synthese p38 MAPK signalering [11, 12].
Het doel van deze studie was om de effecten van duidelijkheid EMD eiwit op de productie en activering van MMP-2 met een osteoblast-achtige cellijn, dat wil zeggen, MG-63. We vonden dat EMD eiwit bevorderde de afbraak van gelatine op MG-63 cellen en versterkt de activering van MMP-2 in MG-63-cellen. De EMD eiwit signaalroutes afhankelijk van p38 MAPK. Deze resultaten suggereren dat selectieve regulering van MMP-2 productie en daaropvolgende activatie van MMP-2 door EMD eiwit in MG-63 cellen leidt tot remodeling en regeneratie van parodontale bindweefsel.
Werkwijzen
Cellijn
Osteoblasten ( MG-63 cellijn; American Type Culture Collection, Rockville, MA) werden in Dulbecco's gemodificeerd Eagle's medium (DMEM) aangevuld met 10% hitte-geïnactiveerd FBS (Equitech-Bio Inc., TX, USA), 2 mM glutamine en 100 onderhouden eenheden /ml penicilline /streptomycine (Invitrogen, Carlsbad, CA) bij 37 ° C in een bevochtigde atmosfeer van 5% CO 2 in lucht.
DQ gelatine degradatie assay
Dekglaasjes werden bekleed met 100 ug /ml geblust fluorescentie substraat DQ-gelatine (Molecular Probes, Eugene, OR). MG-63 cellen werden geïncubeerd met 100 ug /ml EMD eiwit (Seikagaku-Kogyo Corp., Osaka, Japan) in aanwezigheid of afwezigheid van weefselremmer van metalloproteïnasen-2 (TIMP-2, Dainippon Pharm Co., Toyama, Japan) gedurende 20 uur, gevolgd door incubatie op DQ-gelatine beklede platen gedurende 4 h. Cellen werden gefixeerd met 2% paraformaldehyde in PBS. Glaasjes werden gemonteerd dekglaasjes behulp glycerol /PBS, en onderzocht bij 488 nm (excitatie) en 533 nm (emissie) onder gebruikmaking van een Olympus LSM-GB200 (Olympus, Tokyo, Japan) met een olie-immersie objectief. Differentiële interferentie contrast (DIC) werd gebruikt om cellen gekweekt op de matrix zichtbaar.
Western blotanalyse
MG-63 (1 x 10 6) cellen werden voorgeïncubeerd met 100 ng /ml 5 uM SB203580 (Chemicals Inc., Darmstadt, Duitsland) gedurende 30 min bij 37 ° C en MG-63-cellen werden vervolgens in serumvrij DMEM met 100 ug /ml EMD eiwitten voor 48 uur. Geconditioneerde media werden verzameld, gecentrifugeerd om vuil te verwijderen en geconcentreerd onder Amicon Centriprep concentrators (Invitrogen) tot 10-voudig. Cellen werden geïncubeerd in serumvrij Eagle medium met 100 ug /ml EMD eiwitten voor 48 uur. MG-63-cellen bereid zoals hierboven werden gelyseerd met SDS-monsterbuffer (80 mM Tris-HCl, 3% SDS, 15% glycerol en 0,01% broomfenolblauw) beschreven en gesonificeerd kort om DNA afschuiving. Monsters werden gescheiden op 10% SDS-polyacrylamidegels (SDS-PAGE) onder reducerende omstandigheden. Eiwitten werden elektroforetisch overgebracht op polyvinylideen (PVDF, Immobilon-P) membranen (Sigma-Aldrich, Inc., St. Louis, MO). Membranen werden gedurende 1 uur met anti-fosfo-p38 antilichaam (Cell Signaling Technology, Danvers, MA) of anti-p38-antilichaam (Cell Signaling Technology) in PBS met 0,05% Tween-20 en 10% Blockace (Dainippon Pharm Co., Toyama, Japan). Peroxidase-geconjugeerd secundair antilichaam (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) werd gebruikt bij een 1: 1000 verdunning en immuunreactieve banden werden gevisualiseerd met Super Signal West pico chemiluminescerend substraat (Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL). Signalen op elk membraan werd geanalyseerd door VersaDoc 5000.
Omgekeerde transcriptie-polymerasekettingreactie (RT-PCR)
Totaal RNA uit MG-63-cellen cellen werd geïsoleerd door RNeasy kit (Qiagen, Valencia, CA). MG-63-cellen werden vervolgens in serumvrij DMEM met 100 ug /ml EMD eiwitten voor 12 uur. Na denaturatie van totaal RNA bij 70 ° C gedurende 10 min, werd cDNA gesynthetiseerd met oligo-dT primer door incubatie met reverse transcriptase (Qiagen) bij 50 ° C gedurende 30 minuten. De primers voor MMP-2 waren 5'-TGGTTTTCCTCCATCCAGTGG-3 '(voorwaarts) en 5'-CAGGTTGTCTGAAGTCACTGC-3' (omgekeerde). De primers voor GAPDH waren 5'-ACC ACA GTC CAT GCC ATC AC-3 '(voorwaarts) en 5'-TCC ACC ACC TTG CTG CTG TA-3' (omgekeerde). Polymerase kettingreacties werden uitgevoerd met Pfu polymerase (Qiagen) geïnitieerd door 1 cyclus bij 95 ° C gedurende 15 min gevolgd door 30 cycli bij 94 ° C gedurende 45 seconden, 55 ° C gedurende 45 seconden, 72 ° C gedurende 1 min en 1 cyclus bij 72 ° C gedurende 10 min voor laatste verlenging. PCR producten werden geladen in agarose gel en gekleurd met ethidium bromide. De banden werden geanalyseerd met AlphaImager ™ IS-3400 software. In het kort IDV werd gemeten als de som van alle pixelwaarden na achtergrondcorrectie in elke band. De waarden (AVG) van elke band werd berekend als IND /, waar AREA is de omvang van het gebied dat werd gemeten. De resultaten zijn weergegeven de waarden van AVG MMP1 /AVG GAPDH op elk tijdstip.
Resultaten
EMD eiwit-gestimuleerde MG-63-cellen bevorderde afbraak van gelatine
Om te bepalen of EMD eiwit kan osteoblast-gemedieerde afbraak gelatine vergemakkelijken werden humane osteoblasten geïncubeerd in aanwezigheid of afwezigheid van 100 ug /ml EMD eiwit en geplaat op 100 pg /ml DQ-gelatine beklede platen zoals beschreven in de Werkwijzen
( Figuur 1). Afbraak van DQ-gelatine werd gevisualiseerd in het optische gedeelte als een groen fluorescerend signaal. Hoewel niet gestimuleerde MG-63-cellen geen zichtbare signalen (kaders A en C in figuur 1) produceerde, EMD eiwit significant verhoogde afbraak van gelatine (kaders D en F in Figuur 1). Omdat gelatine is een substraat voor MMPs, is het mogelijk dat TIMP-2-cel gemedieerde afbraak van gelatine kan remmen. Om deze hypothese te testen, recombinant TIMP-2 werd geïncubeerd met EMD en MG-63 cellen en daarna gekweekt op gelatine-DQ. TIMP-2 vrijwel volledig geëlimineerd afbraak door EMD gestimuleerde MG-63-cellen (panelen G en I in figuur 1), wat aangeeft dat afbraak van gelatine wordt gemedieerd door de katalytische activiteit van MMP, hetgeen een belangrijke stap in het bevorderen van parodontale bindweefsel tissue remodeling. Figuur 1 EMD eiwit verhoogt MG-63 cellen afbraak van gelatine. MG-63 cellen werden geïncubeerd met (D, E, F) of afwezigheid (A, B, C) van 100 ug /ml EMD gedurende 20 uur, en werden vervolgens geïncubeerd op glas bekleed met 100 ug /ml gedoofd fluorescent substraat DQ-gelatine gedurende nog 4 uur. TIMP-2 (20 uM) werd geïncubeerd met EMD eiwit en MG-63 cellen zoals hierboven (G, H, I) beschreven. Afbraak van gelatine (groene fluorescentie) werd gedetecteerd met een confocale microscoop (excitatie: 488 nm, Emissie: 530 nm). Beelden werden verkregen bij × 40 vergroting (A tot I). Differentieel interferentie contrast (DIC) beelden worden getoond. Kwantificatie van GFP in Panels A-I werd densitometrisch uitgevoerd met behulp van het NIH J software. Dichtheid wordt afgebeeld als gemiddelde GFP per cel.
EMD eiwitrijke MMP-2 activiteit op MG-63-cellen
We toonden eerder aan dat MG-63-cellen spontaan geproduceerd MMP-2, maar niet MMP-9 [10]. Zoals getoond in deze studie, EMD eiwit verhoogde afbraak van gelatine in MG-63-cellen (Figuur 1). Daarom hebben we ook getest of EMD eiwit invloed op de productie van MMP-2 op 100 ug /ml gelatine beklede platen van MG-63-cellen. EMD eiwit (100 ug /ml) verhoogde de productie van 66-kDa, 68 kDa en 46 kDa MMP-2, die overeenkomen met de pro, intermediaire en actieve vormen van dit enzym, respectievelijk. Belangrijk bij EMD-eiwit geactiveerde cellen werden gekweekt op met gelatine beklede platen, het genereren van de actieve vorm van MMP-2 werd ook waargenomen (Figuur 2A). Deze resultaten werden bevestigd door RT-PCR studies aantonen dat het transcriptieniveau van MMP-2 mRNA in de aanwezigheid van EMD werd verhoogd vergeleken met niet gestimuleerde MG-63-cellen (Figuur 2B). Figuur 2 Expressie van MMP-2 van EMD-eiwit gestimuleerde MG-63-cellen. (A) MG-63 cellen werden geïncubeerd in serumvrij Eagle bevattende 100 ug /ml EMD eiwitten voor 24 uur en geconditioneerde media en totale cellysaten werden bereid zoals beschreven in Werkwijzen
. Geconcentreerde media werden gescheiden met 8% SDS-PAGE, geblot met anti-MMP-2 antilichaam en zichtbaar gemaakt met Super Signal West pico chemiluminescent substraat. Moleculaire merkers (kDa) zijn weergegeven in de linker kolom. Kwantificering van MMP-2 in het bovenste paneel werd densitometrisch uitgevoerd met behulp van het NIH J software. Piekhoogte van elk dichtheid worden afgeschilderd als percentage van de maximale valuel. (B) Totaal RNA werd geïsoleerd uit MG-63 cellen gekweekt in aanwezigheid van EMD gedurende 24 uur en onderworpen aan RT-PCR-experimenten met gebruikmaking van specifieke primers voor MMP-2 (boven) of GAPDH (onder).
P38 MAPK pathway betrokken bij EMD-eiwit gestimuleerde MMP-2 activiteit op MG-63-cellen
Eerdere studies hebben aangetoond dat p38 MAPK gereguleerd MMP-2 productie geïnduceerd door verschillende cytokinen [13]. Aldus is het mogelijk dat EMD eiwit stimuleert ook MAP kinases in osteoblasten cellen induceren MMP-2 productie. Om deze hypothese te testen hebben we eerst getest of EMD proteïne kan p38 MAPK activeren met Western vlekanalyse. Wanneer MG63-cellen werden gekweekt in aanwezigheid van 100 ug /ml EMD eiwit op met gelatine beklede platen, werd p38 MAPK activatie waargenomen in een tijdsafhankelijke wijze met maximale fosforylatie bij 5 min (bovenste paneel in figuur 3A). Totaal bedrag van de p38 MAPK eiwit werd niet beïnvloed (onderste paneel in figuur 3A). Een synthetisch specifieke remmer van p38 MAPK, SB203580, elimineerde de activering van dit kinase in EMD-eiwit gestimuleerde MG-63-cellen (Figuur 3B), duidt dit de activering van p38 MAPK in MG-63-cellen in aanwezigheid van EMD protein.In om de rol van EMD-eiwit geïnduceerde p38 MAPK activatie route verder te karakteriseren, werden MG-63-cellen voorbehandeld met SB203580, gevolgd door EMD eiwit stimulatie. SB203580 remde productie en activatie van MMP-2 door EMD eiwit op MG-63-cellen (Figuur 4). Figuur 3 EMD-geïnduceerde activering van p38 MAPK in MG-63-cellen. (A) MG-63-cellen gestimuleerd met 100 ug /ml EMD eiwit gedurende de aangegeven tijd bij 37 ° C. Cellen werden geoogst en lysaten werden opgelost in 10% SDS-PAGE en overgebracht naar een PVDF membraan. Membranen werden immunoblotting met anti-fosfo-p38 MAPK antilichaam (top
), en werden vervolgens gestript en onderworpen aan immunoblotting met anti-p38 MAPK antilichaam (onderaan
). Moleculaire merkers (kDa) zijn weergegeven in de linker kolom. (B) MG-63-cellen werden gedurende 30 min met SB203580 (5 uM) voor stimulering met 100 ug /ml EMD eiwitten voor 5 min. Cellen werden geoogst en lysaten werden opgelost in 10% SDS-PAGE en overgebracht naar een PVDF membraan. Het membraan werd onderworpen aan immunoblotting met anti-fosfo-p38 MAPK antilichaam (bovenste
), en werd vervolgens gestript en onderworpen aan immunoblotting met anti-p38 MAPK antilichaam (onderste
). Moleculaire merkers (kDa) zijn weergegeven in de linker kolom. Kwantificering van p38 MAPK fosforylering werd densitometrisch uitgevoerd en verbeterd ten opzichte van de totale hoeveelheid p38 MAPK eiwit. Piekhoogte van elk dichtheid worden afgeschilderd als procent van de maximale waarde.
Figuur 4 Effecten van MEK op de afbraak van gelatine in EMD eiwit gestimuleerd MG-63 cellen. Geconcentreerde geconditioneerde media bereid uit gestimuleerde MG-63-cellen (laan 1
), EMD-eiwit gestimuleerde MG-63-cellen (5 uM) (laan 2
), EMD-eiwit gestimuleerde MG-63-cellen in de aanwezigheid van DEMSO (laan 3
), EMD-eiwit gestimuleerde MG-63 cellen gekweekt in aanwezigheid van SB203580 (5 uM) (laan 4
) werden gescheiden op 8% SDS-PAGE. Membranen werden geblot met anti-MMP-2 antilichaam en zichtbaar gemaakt met Super Signal West Pico chemiluminescent substraat. Molecuulgewichtsmerkers (kDa) zijn weergegeven in de linker kolom. Dezelfde geconcentreerde geconditioneerde media werden gescheiden en overgebracht naar membranen. Piekhoogte voor elke dichtheid worden afgeschilderd als procent van de maximale waarde.
P38 MAPK route is betrokken bij EMD-eiwit gestimuleerde gelatine afbraak door MG-63 cellen
Ten slotte hebben we deze resultaten in cel-gemedieerde gelatine afbraak studies bevestigd. MG-63 cellen werden geïncubeerd met EMD eiwit in aanwezigheid of afwezigheid van SB203580, en werden vervolgens op DQ-gelatine matrix. Consistent met de resultaten in figuur 1, EMD eiwitrijke de afbraak van gelatine (kaders D, E, F in figuur 5), in vergelijking met niet-gestimuleerde MG-63-cellen (panelen A, B, C in figuur 5). Bij SB203580 werd gezamenlijk geïncubeerd met EMD eiwit afbraak van gelatine werd gestopt, hetgeen blijkt uit een significante afname van specifieke fluorescentiesignalen (panelen G, H, I in figuur 5). Deze bevindingen suggereren dat MMP-2 een belangrijke gelatine-afbrekende enzym dat door EMD-eiwit gestimuleerde osteoblasten. Figuur 5 p38 MAPK trajecten zijn belangrijk voor EMD-eiwit gestimuleerde MG-63-cellen gemedieerde afbraak van gelatine. Glas werd bekleed met 100 ug /ml gedoofd fluorescent substraat DQ-gelatine. MG-63-cellen werden gedurende 30 min met U0126 (5 uM). Cellen werden geïncubeerd in aanwezigheid of afwezigheid van 100 ug /ml EMD eiwitten voor 20 uur. Afbraak van gelatine (groene fluorescentie) werd gedetecteerd met een confocale microscoop (excitatie: 488 nm, Emissie: 530 nm). Beelden werden verkregen bij × 40 vergroting (A tot I). Differentieel interferentie contrast (DIC) beelden worden getoond. Dichtheid wordt weergegeven als gemiddelde GFP per cel.
Deze resultaten suggereren ook dat EMD eiwit stimuleert matrixafbraak betrokken bij de katalytische activiteit van MMP-2. Bovendien zijn onze studie wijst op de cruciale rol van p38 MAP kinase pathways in het induceren van MMP-2 productie van EMD-eiwit gestimuleerd osteoblasten.
Discussie
In deze studie hebben we aangetoond dat EMD-eiwit stimuleert osteoblasten gelatine afgebroken in vitro en dat de productie van MMP-2 is opgereguleerd in reactie op stimulatie EMD eiwit. Onze resultaten suggereren ook dat hechting gelatine verhoogt de productie van en activeert pro-MMP-2, die spontaan wordt gevormd door osteoblasten. EMD eiwit stimuleert p38 MAPK signaleringsroutes, die op hun beurt induceren MMP-2 productie door osteoblasten. Hoewel eerdere studies hebben aangetoond dat EMD eiwit dat periodontale defecten in de wortel blootgelegde dentine wordt geabsorbeerd en veroorzaakt parodontale weefselregeneratie [14-16], de mechanismen van deze maatregelen blijven grotendeels onbekend. In dit opzicht tonen onze resultaten de cruciale rol van MMP-2 geproduceerd uit osteoblasten in reactie op EMD eiwitten faciliteren parodontale bindweefsel regeneratie.
MMP-2 speelt een cruciale rol bij botombouw en mineralisatie [17], en verschillende studies hebben de functionele rol van specifieke MMP's [18-20] beoordeeld. Onze resultaten verdere ondersteuning van het belang van MMP's geproduceerd door EMD-eiwit gestimuleerd osteoblasten in het bot remodeling. De waarnemingen van de resterende afbraak van ECM in de aanwezigheid van TIMP-2 kunnen worden verklaard door de betrokkenheid van andere proteasen, zoals serine protease. Inderdaad, recente studies hebben aangetoond dat osteoblasten uitdrukken oppervlak serineprotease [21]. De significante remming van gelatine afbraak door TIMP-2 suggereert dat EMD eiwit verhoogt de productie van MMP's aan celoppervlakken, die osteoblast-gemedieerde gelatinolysis vergemakkelijkt. In deze studie hebben we aangetoond dat MMP-2 spontaan wordt geproduceerd uit niet gestimuleerde osteoblasten, en dat gelatinase wordt geactiveerd in de aanwezigheid van EMD eiwit. Daarentegen eerdere studies hebben aangetoond dat gelatinase MMP-9 werd niet door EMD-eiwit geactiveerde osteoblasten [10].
EMD eiwit bevat zowel TGF-β- en BMP-achtige groeifactoren, die bijdragen tot de inductie van biomineralization tijdens parodontale regeneratie [22]. BMP-2 is aangetoond voor botherstel in vivo [23] bevorderen, versterken alkalische fosfataseactiviteit [24, 25], en hogere productiekosten MMPs [26, 27], wat erop wijst dat de cytokinen die in EMD noodzakelijk bot bevorderen zijn regeneratie. EMD eiwitten activeert ook alkalische fosfatase-activiteit [28]. Het is mogelijk dat de TGF-β en BMP EMD eiwitten activeren osteoblasten. Onze gegevens tonen aan dat EMD eiwit verhoogt de productie van MMP-2 door osteoblasten cellen en suggereren dat botregeneratie afhankelijk van MMP-2 geactiveerde EMD. Deze documenten ondersteunen onze gegevens [29, 30]. EMD eiwit hebben de niveaus van MMP-1 en MMP-8 in het tandvlees crevicular vloeistof af na flap chirurgie in vivo [6].
EMD-geïnduceerde VEGF productie wordt gereguleerd door p38 MAPK in menselijke gingivale fibroblasten [31].
We voorzien ook aanwijzingen identificeren p38 MAPK als de belangrijkste route voor het induceren van MMP-2 productie in EMD-gestimuleerde osteoblasten. Eerdere studies hebben aangetoond dat deze route is belangrijk voor de groei van cellen gestimuleerd door PDL EMD eiwit [32] bevorderen. Dus de familie MAPK, waaronder de p38 MAPK, ERK en JNK trajecten geactiveerd door EMD eiwit, speelt een belangrijke rol bij het reguleren van cellulaire functies voor parodontale regeneratie [33]. EMD-geïnduceerde VEGF wordt gereguleerd door p38 MAPK in humane gingivale fibroblasten [31]. p38 MAPK zou kunnen regelen niet alleen MMP productie, maar ook cytokine productie in EMD gestimuleerd parodontale ligament. Onze studie toont ook aan dat remming van EMD-eiwit geïnduceerde productie van MMP-2 leidt tot een significante vermindering van de vorming van actieve MMP-2, verder de opvatting ondersteunt dat MMP-2 werkt als een afbraak van gelatine voor MMP-2 in EMD eiwit gestimuleerde osteoblasten.
Samenvattend suggereren onze resultaten een model waarbij MMP-2 een rol speelt bij periodontale bindweefsel hermodellering door afbrekende matrix eiwitten en /of door het activeren van een krachtige gelatinase MMP-2 in osteoblasten.
Conclusie
EMD eiwit induceert MMP-2-productie via de p-38 MAPK-activerende signaalwegen in osteoblasten, waardoor de afbraak van de omringende collageen stimuleren, wat resulteert in veranderingen in de ECM de structuur en de bevordering van parodontale regeneratie.
verklaringen
Erkenning
dit werk werd ondersteund door Grant-in-Steun voor Wetenschappelijk Onderzoek (C) 24592853, 23592755 en 23592786. de auteurs verklaren geen mogelijke belangenconflicten met betrekking tot het auteurschap en /of publicatie van dit artikel.
auteurs 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 12903_2014_420_MOESM2_ESM.gif Authors' 12903_2014_420_MOESM1_ESM.tiff Auteurs originele bestand voor 'originele bestand voor figuur 3 12903_2014_420_MOESM4_ESM.gif Authors' figuur 2 12903_2014_420_MOESM3_ESM.gif Auteurs originele bestand voor figuur 4 originele bestand 12903_2014_420_MOESM5_ESM.tiff Authors 'voor figuur 5 'originele bestand voor figuur 6 12903_2014_420_MOESM7_ESM.jpeg Authors' 12903_2014_420_MOESM6_ESM.jpeg auteurs originele bestand voor figuur 7 Competing belangen Ondernemingen De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen. bijdragen
Authors '
SG deelgenomen aan de planning en ontwerpen de studie, in de data-analyse en het opstellen van het manuscript. HI speelde het grootste deel van het laboratoriumwerk en nam deel aan de data-analyse. OS, YU, ED en TI hebben deelgenomen aan de data-analyse. Alle auteurs hebben gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.
