Abstracte achtergrond
Het doel van dit onderzoek was om de reactie van de rat bindweefsel te vergelijken met twee wortel-end vulmaterialen: wit Mineral Trioxide Aggregate (WMTA ) en Diaket.
Werkwijzen
Elk van de materialen is in het dentine buizen gebracht en subcutaan in de dorsale bindweefsel van 21 Wistar albino ratten. Weefsel biopten werden verzameld 7, 30, en 60 dagen na de implantatie procedure. De monsters werden verwerkt en gekleurd met hematoxyline en eosine en microscopisch onderzocht. Na het bepalen inflammatoire celaantallen in secties van elk monster werden ontstekingsreactie scores als volgt gedefinieerd: 0; geen of weinig ontstekingscellen (geen reactie), 1; minder dan 25 cellen (milde reactie), 2; 25 tot 125 cellen, (middelgrote reactie) en 3; 125 of meer cellen (ernstige reactie). Statistische analyse werd uitgevoerd met de Kruskal-Wallis en Mann-Whitney test.
Resultaten
Er waren statistisch significante verschillen in de gemiddelde aantallen ontstekingscellen gedurende drie testperiode, met de meest ernstige mate van ontsteking waargenomen op de ene -week periode. Enkele gevallen van necrose waargenomen met WMTA. Diaket vertoonden de meest ernstige mate van ontsteking en necrose. Na 30 dagen, beide materialen uitgelokt gematigde ontstekingsreactie. De acht weken bleek de minst ernstige mate van ontsteking in alle groepen.
Conclusie Geconcludeerd werd dat WMTA vertoont een gunstiger weefselreactie tegen Diaket die ernstiger ontstekingsreactie dan WMTA en de controle veroorzaakte.
Electronic aanvullend materiaal
De online versie van dit artikel (doi:. 10 1186 /1472-6831-11-17) bevat aanvullend materiaal, dat beschikbaar is voor geautoriseerde gebruikers is achtergrond
A. periapical chirurgische ingreep gaat meestal wortel-end resectie, voorbereiding en afdichting, met behulp van een wortel-end vulmateriaal. Succes van de operatie kan afhangen van het afdichtende vermogen van de wortel-end vulmateriaal om binnendringen van bacteriën of bijproducten, alsmede in het vermogen om een gunstig klimaat voor de regeneratie en genezing van periradiculaire weefsels [1, 2 voorkomen ].
Mineral trioxide aggregaat (MTA) werd ontwikkeld als een wortel-end vulmateriaal bij Loma Linda University, Californië, Verenigde Staten [1]. De belangrijkste verbindingen die in dit materiaal tricalciumsilicaat, tricalciumfosfaat aluminaat, silicaat en tricalciumfosfaat oxide oxide [2]. In vivo Kopen en in vitro studies ondersteunde
het mogelijke gebruik van dit materiaal als een wortel-end vulmateriaal [3-5]. Eerdere onderzoeken toonden ook aan dat de MTA aan hard weefsel afzetting bevorderen [3, 6, 7] en de goede afdichting vermogen in vergelijking met andere materialen [3, 8-10]. Bovendien MTA bleek goed verdragen en biocompatibele [11-17], en onthulde een gunstiger periapical weefselreactie tegen amalgaam, IRM en Super EBA [4, 5, 18].
Diaket een calciumchelaatcomplexen versterkt met polyvinyl hars [19]. Aanvankelijk was geformuleerd als een wortelkanaalbehandeling sealer wanneer gemengd in een poeder vloeistof verhouding 1: 1. Tetsch, in 1986, eerste gedocumenteerde gebruik van Diaket als een wortel-end vulmateriaal indien gemengd met een dikkere consistentie [20]. Diaket aangetoond acceptabele eigenschappen [21-23]. Aangetoond superieure afdichting ten opzichte van amalgaam [23], een gunstige geneeskrachtige eigenschappen ervan bij honden [22] en een betere genezende reactie vergeleken met guttapercha [24].
Zowel Diaket en MTA bleken periradiculaire weefselregeneratie bevorderen . . De hanteringseigenschappen van Diaket werden geacht superieur aan die van MTA [21] te
Het doel van deze studie was om de reactie van de rat bindweefsel twee wortel-end vulmaterialen vergelijk: witte minerale Trioxide Aggregate (WMTA) en Diaket.
Methods
Twintig een mannetje, 5-6 maanden oude Wistar albino ratten met een gewicht 350 ± 50 g werden gebruikt. Dierlijke zorg werd volgens de Institutional Animal Care en gebruik Comite en de Canadese Raad over Animal Care [25, 26] uitgevoerd. Het protocol werd goedgekeurd door de Jordaan Universiteit voor Wetenschap en Technologie decanaat van Research, en de Universiteit Animal Care en gebruik Comite. De volgende groepen werden onderzocht:
Groep 1:. Controle groep (lege dentine buizen)
Groep 2: White Mineral Trioxide Aggregate (Dentsply, Tulsa Dental, Tulsa, OK, USA)
Groep 3:. Diaket , (3 M ESPE AG, Seefeld, Bayern, Duitsland).
dentine buizen werden bereid uit menselijke tand wortels van enkele geworteld tanden met een lengte van 7 mm. De kanalen werden uitgebreid gebruikt ProTaper bestanden (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Zwitserland) en Gates Glidden boren (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Zwitserland) tot een dikte van de buitenwand van 0,5-1 mm. De apicale foramina werden vergroot tot een diameter van ongeveer 2 mm. De dentine buizen werden overvloedig besproeid met 3% natriumhypochloriet en 18% EDTA (ethyleendiamine-tetra-azijnzuur), (Ultra Dent, USA), gewassen met gedestilleerd water en vervolgens geautoclaveerd. Voor elk dier werden drie buizen gebruikt, twee als dragers van de twee geteste materialen en een lege buis ter controle.
WMTA werd gemengd volgens de aanbevelingen van de fabrikant. Diaket werd gemengd tot een consistentie (poeder tot vloeistofverhouding van 2: 1) dikker is dan de aanbevelingen van de fabrikant, [21]. De materialen werden toegepast in de buizen. Ondernemingen De dieren werden geanesthetiseerd onder toepassing van een schema bestaande atropine (0,02-0,05 mg /kg), ketamine hydrochloride (40-87 mg /kg) en xylazine hydrochloride (5-13 mg /kg). De dorsale huid van de dieren werden geschoren en gedesinfecteerd met 5% joodoplossing. Twee centimeter lange incisies gemaakt in de rug van elk dier, ten minste 2 cm van elkaar, met een zonder. 15 mes (Aesculap AG & Co. KG, Tutlingen, Duitsland) in een kop-staart oriëntatie. De huid werd gereflecteerd en subcutane ruimten zijn gemaakt door stompe dissectie. De dentine buizen werden direct geïmplanteerd in de ruimten. De huid werd gesloten met 3/0 zijden hechtdraad.
Evaluaties werden gemaakt op 7, 30, en 60 dagen na chirurgische implantatie. In elke evaluatie periode werden 7 dieren gedood met behulp van een verdoving overdosis. De dorsale huid werd geschoren en de buizen werden uitgesneden met het omringende bindweefsel. De uitgesneden monsters werden in 10% formaline oplossing gedurende 2 weken. Na weefselverwerking en inbedding, werden seriële secties van 6 urn dikte bereid en gekleurd met hematoxyline en eosine. Secties werden onderzocht en geëvalueerd met behulp van een lichtmicroscoop (Olympus, U-MDOB BX 40, Olympus optische Co LTD, Japan) op × 40 × 100 en 400 × vergrotingen. Voor elk materiaal, de som en het gemiddelde van ontstekingscellen (polymorfonucleaire leukocyten (PMN), plasmacellen, lymfocyten, macrofagen en gigantische cellen) en fibroblasten werden bepaald in tien verschillende gebieden op × 400 vergroting. De waarnemer werd verblind voor het weefsel bron
reacties in het weefsel werden gescoord als:. 0, geen of weinig ontstekingscellen (geen reactie); 1, minder dan 25 cellen (milde reactie); 2, tussen 25 en 125 cellen (middelgrote reactie); en 3, 125 of meer cellen (ernstige reactie) [13, 27, 28]. Necrose en /of suppuratie werden gecategoriseerd als "ja" of "nee".
De resultaten werden statistisch geanalyseerd met behulp van de Kruskal-Wallis en Mann-Whitney tests voor de vergelijking van de ernst van de ontsteking met intervallen en voor materialen.
Resultaten
Controlegroep
in monsters verkregen bij 7 dagen, vasculair granulatieweefsel waargenomen (Figuur 1 a) die werden gedomineerd door PMNs, plasmacellen en lymfocyten, met enkele grote cellen en macrofagen. Ontstoken granulatieweefsel dat in de buizen was gegroeid werd ook waargenomen (Figuur 1.b). Op 30 dagen, milde inflammatoire cel infiltraten, vooral gedomineerd door lymfocyten en dunne vezelige capsules rond de buizen, werden waargenomen (figuur 1.c). Ontstoken granulatieweefsel werd ook opgemerkt in de buizen, maar met minder inflammatoire infiltratie (Figuur 1.d). Op dag 60, werden enkele verspreide inflammatoire celinfiltraten waargenomen (Figuur 1.e), naast een toename van fibroblast activiteit en een dikkere fibreus kapsel. Geen necrose werd gedetecteerd. Figuur 1 Histologische beelden van infiltratie van ontstekingscellen eind geïmplanteerde buizen en ingroei van granulatieweefsel weefsels in de buizen controle en MTA groepen (hematoxyline-eosine kleuring). (A) sterk vasculair, matig ontstoken granulatieweefsel (G) aan het dentine buiseinde (D) in de controlegroep van 7 dagen; oorspronkelijke vergroting x 50. (b) ingroei van granulatieweefsel ontstoken (I) in het lumen van de buis in de controlegroep van 7 dagen. Ruimte waar voorheen dentine buisuiteinde wordt weergegeven met (S); oorspronkelijke vergroting x 100. (c) Een dunne fibreuze capsule (FC) rond de lege buis dentine (D) en 30 dagen; oorspronkelijke vergroting x 200 (d) ingroei van granulatieweefsel ontstoken (I) in een lege buis dentine (D) en 30 dagen; oorspronkelijke vergroting x 200. (e) Heel lichte ontsteking waargenomen bij sommige gevallen van de controlegroep bij 60 dagen, waarbij lymfocyten (L) waren de voornaamste cellen; oorspronkelijke vergroting x 400. (f) Actief angiogenese met ontstoken granulatieweefsel in het gebied in contact met MTA na 7 dagen. Meerkernige reusachtige cel met verzwolgen MTA (GM); oorspronkelijke vergroting x 200. (g) Necrosis in de ruimte naast MTA materiaal (M) en 7 dagen; oorspronkelijke vergroting x 200. (h) Milde ontstekingsreactie in een MTA specimen op 30 dagen; oorspronkelijke vergroting x 400. (i) Ettering (SP) waargenomen in de ruimte naast MTA materiaal (M) aan de buis bij 30 dagen; oorspronkelijke vergroting x 50.
Er was een statistisch significant verschil in de som van ontstekingscellen tussen de drie testperiode voor de controlegroep (P-waarde & lt; 0,05). Het inflammatoire aantal cellen was significant hoger voor de 7-daagse dan de 30-dagen-groep.
WMTA groep
In monsters verkregen na 7 dagen, necrose omgeven door actieve angiogenese en matig ontstoken granulatieweefsel werd waargenomen (Figuur 1. h, g). Het infiltraat werd overheerst door PMN, lymfocyten, plasmacellen, macrofagen en gigantische cellen. Vertaald ontstekingsreacties waargenomen op dag 30 die werden gekenmerkt door necrose en /of suppuratie, omgeven door een matige inflammatoire infiltraat (figuur 1.h, i). Fibroblastische verhoogde activiteit en schaarse reuzencellen en macrofagen werden ook gedetecteerd (Figuur 2.a). De ontsteking was mild op dag 60, en wordt gedomineerd door lymfocyten, macrofagen en reuzencellen, met een toename van fibroblast activiteit. Daarnaast werd een osteoïde-materiaal grenzend waargenomen dat de WMTA op dag 60 (Figuur 2.b) in een monster. Figuur 2 Histologische beelden van inflammatoire infiltratie en weefselreactie kenmerken eind geïmplanteerde buizen in MTA en Diaket groepen (hematoxyline-eosine kleuring). (A) Er zijn maar weinig macrofagen en reuze cellen (G) waargenomen in de MTA groep op 30 dagen; oorspronkelijke vergroting x 400. (b) osteoïd-materiaal (OS) waargenomen in de ruimte naast MTA (M) en 60 dagen; oorspronkelijke vergroting x 100. (c) Ernstige en uitgebreide liquefactive necrose of suppuration (N) in het gebied grenzend aan materiaal (M) Diaket 7 dagen; oorspronkelijke vergroting x 100. (d) reuzencellen (G) en macrofagen in het bindweefsel naast Diaket in 30 dagen; oorspronkelijke vergroting x 200. (e) Zachte ontsteking waargenomen in het gebied grenzend aan Diaket (M) en 60 dagen; oorspronkelijke vergroting x 100. (f) Overwicht van lymfocyten in de Diaket groep op 60 dagen; oorspronkelijke vergroting x 50.
Een statistisch significant verschil werd gevonden in de som van ontstekingscellen tussen de drie testperiode voor deze groep. De hoogste som van ontstekingscellen werd voor de 7-daagse groep en het laagst bij de 60 dagen aan. Er werden echter significante verschillen gevonden alleen tussen de 7-dagen-groep en 60-dagen-groep, en tussen de 30-dagen-groep en de 60-dagen-groep.
Diaket groep
In secties verkregen na 7 dagen, uitgebreide liquefactive necrose omgeven door sterk doorbloed ontstoken granulatieweefsel werd gedetecteerd (Figuur 2.c). De overheersende ontstekingscellen waren PMN's, plasmacellen en macrofagen. Bij 30 dagen na implantatie, de ontstekingsreactie af met een toename van reusachtige cel en macrofaag infiltraten (figuur 2.d). Op dag 60, de ontsteking was mild tot matig (figuur 2.e), en wordt gedomineerd door lymfocyten en plasmacellen (figuur 2.f). Geen necrose werd waargenomen. Fibroblastische verhoogde activiteit werd ook gemerkt, maar was niet zo uitgesproken als in de standaard en WMTA Groepen in statistisch significante verschillen werden waargenomen tussen de som van ontstekingscellen tussen de drie testperiode. (P & lt; 0,05). De enige statistisch significant verschil was die tussen de 7 dagen en 60 dagen periode (P & lt; 0,05), waarbij de periode van 7 dagen vertoont de hoogste gemiddelde waarde voor de som van ontstekingscellen, gevolgd door de 30-daagse . vervolgens de periode van 60 dagen
Vergelijking tussen de groepen
7 dagen
Er waren statistisch significante verschillen (KW = 7,78, p & lt; 0,05) in inflammatoire cel aantallen tussen de drie groepen. De mediane inflammatoire cel score in de Diaket groep (mediaan score van 2) was significant hoger dan in de WMTA (mediaan score van 1) en de controlegroep (mediane score van 1) groep (p & lt; 0,05). Necrose werd waargenomen in alle exemplaren in de Diaket groep en in drie exemplaren in de WMTA Groep Victoire 30 dagen
Er waren statistisch significante verschillen. (KW = 6,84, p & lt; 0,05) in inflammatoire cel aantallen tussen de drie groepen . De mediane inflammatoire cel score in de Diaket groep (mediaan score van 2) was significant hoger dan in de controlegroep (mediane score van 1), (p & lt; 0,05). Geen andere significante verschillen gevonden. Necrose werd waargenomen in slechts één model in de Diaket groep en een model in de WMTA Groep Victoire 60 dagen
Er waren statistisch significante verschillen (KW = 6,43, p & lt; 0,05). In inflammatoire cel aantallen tussen de drie groepen . De inflammatoire cel scores in de Diaket groep (mediaan score van 1) waren significant hoger dan in de WMTA (mediaan score van 0) en de controlegroep (mediane score van 0). Necrose werd niet gedetecteerd in een specimen verkregen 60 dagen na de implantatie.
Discussie
De histologische reactie op endodontische materialen geïmplanteerd in het onderhuidse bindweefsel van ratten zorgt voor een voorlopige bron van informatie over hun biocompatibiliteit die relatief eenvoudig en geschikt voor de routine testen van endodontic materialen [29, 30]. Vroege experimenten op implantatie proeven betrokken directe insertie van het geteste materiaal in de zachte weefsels van proefdieren [31, 32]. Het nadeel van deze werkwijze is dat een relatief groot gebied van materiaal in contact met het weefsel en dus zou de onmiddellijke reactie ernstig zijn. Daarom is de implantatie van het testmateriaal in een drager aanbevolen [12, 13]. Vergeleken met rechtstreekse toepassing van het materiaal, deze methode helpt om het materiaal te stabiliseren plaats, en bereiken een gestandaardiseerd materiaal-weefsel-grensvlak [13].
Sommige eerdere studies gebruikt silicium [30], Teflon [29, 31], en polyethyleen [13, 33]. In deze studie werden dentine buizen gebruikt voor subcutane implantatie in overeenstemming met andere eerdere studies, om het huidige onderzoek meer klinisch relevant [12, 34] maken. Een nadeel van het gebruik van menselijke oorsprong als dragers is de moeilijkheid van normalisatie van de grootte van de buizen. Bovendien kan een immunologische reactie op vreemde eiwitten voorkomen [31]. De reactie lege dentine buizen was in overeenstemming met eerdere rapporten waaruit bleek dat lege dentine buizen geïnduceerde milde ontsteking en vorming van vezelig capsules [12, 34]. De lege dentine buizen werden gebruikt als een controle om een verhoging van inflammatoire celtellingen door de reactie aan dentine [7, 12]. Ondernemingen De onderzochte materialen werden gebruikt in de uitgeschakelde toestand om de klinische situatie na te bootsen sluiten. WMTA moeilijk te hanteren, en dit is een van de nadelen, omdat het de neiging te smeren en vervuilen het werkgebied. Daarom werd nauwgezette aandacht beoefend tijdens de plaatsing van WMTA in de dentine buizen. In de klinische situatie WMTA moet worden voorzichtig mee om dit probleem te minimaliseren. Ondernemingen De reactie waargenomen in de controlegroep was in overeenstemming met eerdere rapporten [12-14]. Er was een significante daling van continue ontstekingsreactie gepaard met een toename van fibroblast activiteit. Hoewel PMN op de 7e dag werden overheerst, ze vertoonden een lagere gemiddelde tellen in vergelijking met Diaket en WMTA groepen. Deze gemiddelde waarde daalde significant na 30 en 60 dagen, wat aangeeft dat lege dentine buizen een eerste ontstekingsreactie kan hebben veroorzaakt. De ontstekingsreactie op 7 dagen kan worden veroorzaakt door de toxische effecten van het geïmplanteerde materiaal, of het trauma geproduceerd tijdens de plaatsing van de buizen, terwijl 30 en 60 dagen, kan de ontstekingsreactie worden toegeschreven aan het cumulatieve effect van de toxiciteit van de testmaterialen.
het weefsel reactie op WMTA die vergelijkbaar is met de bevindingen van eerdere studies [12-14] was. Zevendaagse resultaten toonden een gematigde en vreemd lichaam reactie die gedaald op 30 dagen en significant verminderd bij 60 dagen en ging gepaard met een duidelijke toename van de fibroblast activiteit. Dit wijst op een toename van het reparatieproces en verdraagbaarheid van het bindweefsel. Bovendien is de osteoid-materiaal waargenomen op dag 60 is enigszins vergelijkbaar met eerdere bevindingen dat de vorming van dystrofische calcificatie [13] beschreven. Ondernemingen De belangrijkste verbindingen die in MTA zijn tricalciumsilicaat, tricalciumfosfaat aluminaat, silicaat en tricalciumfosfaat oxide oxide [ ,,,0],2]. Na reactie met weefselvocht, calciumoxide produceert calciumhydroxide. Het calciumhydroxide wordt vervolgens los in Ca
+ en OH -. De gediffundeerde hydroxylionen verhogen de pH en bevorderen alkaliseren in de aangrenzende weefsels, die genezing bevordert [7]. Bovendien werd de biocompatibiliteit van MTA ook toegeschreven aan de neiging om vrij calcium en zijn vermogen om hydroxyapatiet [35] te vormen.
Diaket veroorzaakt een eerste heftige reactie, maar beide uitslagen 30- en 60-dagen bleek dat de ontstekingsreactie daalde tot een milde tot matige respons. Deze observaties zijn vergelijkbaar met de bevindingen van een eerder onderzoek [31]. Bovendien is een significante toename van het gemiddelde van de som van de inflammatoire cellen op dag 60 werd waargenomen, samen met een minimale stijging fibroblast activiteit.
Dit kan betekenen dat Diaket de neiging om ernstiger en acute inflammatoire initiële induceren reactie met uitgebreide liquefactive necrose en /of suppuratie dan WMTA. Op 30 dagen, de WMTA en Diaket groepen vertoonde vergelijkbare gemiddelde inflammatoire cel telt. De ontstekingsreactie ernst aanzienlijk afgenomen op dag 60. Gelijkaardige resultaten in een eerdere dierstudie werden verkregen ondanks de verschillen in de methode die is vergeleken met de huidige onderzoek [21]. Ondernemingen De initiële ernstige ontstekingsreactie op Diaket kan veroorzaakt door de mogelijke initiële afgifte van het materiaal bestanddelen, en wanneer er een afname in de hoeveelheid van die uitloogbare stoffen, de ontsteking verminderde ernst en het materiaal meer verdragen door weefsels.
conclusie Concluderend, de aanvankelijke ontstekingsreactie respons veroorzaakt door WMTA gunstiger was dan de respons veroorzaakt door Diaket. Echter, met het verstrijken van de tijd, was er een duidelijke vermindering van de ernst van de ontstekingsreactie, en een verhoging van de activiteit fibroblastische materiaal-. Additionele experimenten zijn nodig om deze bevindingen te bevestigen
Afkortingen
WMTA:.-Witte Mineral trioxide aggregaat
EDTA:
ethyleendiamine-tetra azijnzuur
PMN:
polymorfonucleaire leukocyten
verklaringen
Dankwoord en Funding
het onderzoek werd gefinancierd door het onderzoek decanaat bij Jordan Universiteit voor Wetenschap en Technologie subsidie nummer 53/2006.
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 12903_2010_185_MOESM2_ESM.pdf Authors' 12903_2010_185_MOESM1_ESM.pdf Auteurs originele bestand voor figuur 2 Concurrerende belangen Ondernemingen De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen. Bijdragen
Authors '
AW deelgenomen aan de ontwikkeling van de methodiek van het onderzoek, het assisteren bij de voorbereiding van de monsters, het opstellen van het manuscript en statistische analyse. AM deed het experimentele werk, bijgestaan bij het opstellen van het manuscript en in het onderzoek van de monsters. HH deelgenomen aan de ontwikkeling van de methodologie van het onderzoek, en heeft voorbereid en onderzocht de monsters. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het manuscript finale
