3 CFU /ml remde de groei iets voor drie van de vijf MS stammen (S. mutans
NCTC 10449, S. sobrinus
OMZ176 en S. mutans
P1: 27), terwijl een lage concentraties van L. acidophilus
LA5 had geen invloed op MS groei. In het algemeen werden geen significante verschillen in groei-inhibitie waargenomen tussen de referentiestammen en orale isolates.Table 2 Remming van groei van mutans streptococcen stammen door geselecteerde probiotische lactobacilli bij verschillende celconcentraties.
< col>
|
mutans streptococcen (remming score)
Lactobacilli
CFU/ml
Ingbritt
NCTC
10449
OMZ176
P1:27
P2:29
L. plantarum 299v
103-109
0
0
0
0
0
L. plantarum
931
103-109
0
0
0
0
0
L. rhamnosus GG
105-109
0
0
0
0
0
ATCC 53.103
103
0
1
1
1
0
L. rhamnosus
105-109
0
0
0
0
0
LB21
103
1
1
1
1
1
L. paracasei
105-109
0
0
0
0
0
F19
103
1
1
1
1
1
L. reuteri
105-109
0
0
0
0
0
PTA5289
103
1
1
1
1
1
L. reuteri
105-109
0
0
0
0
0
ATCC 55.730
103
1
1
1
1
1
L. acidophilus
109
0
0
0
0
0
LA5 *
107
0
1
1
0
1
|
105
1
1
1
1
1
|
103 kopen van 2 kopen van 2
2 kopen van 2 kopen van 2
remming scores; 0 = totale remming; 1 = lichte remming;. 2 = geen remming
* p & lt; 0,05 , chikwadraattoets.
groei remming van Candida albicans
alle geteste lactobacilli stammen verminderd candida groei, maar het effect was over het algemeen zwakker dan voor mutans streptococcen. Sinds een identieke remming patroon voor alle candida stammen werd weergegeven de resultaten van de testen voor slechts één hiervan worden weergegeven in tabel 3. bij concentraties 10 9 en 10 7 CFU /ml, alle lactobacilli behalve L. acidophilus LA5
en L. reuteri
PTA 5289 remde de vijf stammen candida volledig. Op 10 5 CFU /ml, L. rhamnosus
LB21, L. rhamnosus GG
ATCC 53.103, L. paracasei
F19 en L. reuteri
PTA 5289 toonde een lichte inhibitie, L . acidophilus
LA5 toonde geen remming bij dit alles terwijl L. plantarum
299v, L. plantarum
931 en L. reuteri
ATCC 55.730 uitgevoerd in totaal remming. Bij de laagste cel concentratie, werd geen remming opgenomen met uitzondering van de twee L. plantarum
strains.Table 3 Groei remming van Candida albicans
ATCC 28366 door geselecteerde probiotische lactobacillen bij verschillende cel concentraties.
< col> Zeef
Cell concentratie (CFU /ml)
109
107
105
103
L. plantarum 299v
0
0
0
1
L. plantarum
931
0
0
0
1
L. rhamnosus GG
ATCC 53.103
0
0
1 kopen van 2
L. rhamnosus
LB21
0
0
1 kopen van 2
L. paracasei
F19
0
0
1 kopen van 2
L. reuteri
PTA 5289
1
1
1 kopen van 2
L. reuteri
ATCC 55.730
0
0
0 kopen van 2
L. acidophilus
LA5
1
1 kopen van 2 kopen van 2
Remming scores; 0 = totale remming; 1 = lichte remming; 2 = geen remming.
PH-metingen Ondernemingen De initiële pH op het oppervlak van M17 en SAB agarplaten waren 6,8 en 5,8, respectievelijk. Na incubatie werd de pH verlaagd in alle platen geïnoculeerd met lactobacilli en varieerde tussen 3,7 en 5,3 in de platen met 10 3 CFU /ml (tabel 4). L. acidophilus LA5
getoonde hoogste pH-waarden, met de laagste waarden vermeld voor de L. plantarum
strains.Table 4 Final pH op het oppervlak van M17 en SAB agarplaten na incubatie met geselecteerde probiotische lactobacilli (103 CFU /ml).
Zeef
M17 agar
SAB agar
L. plantarum
299v
4.4
3,7
L. plantarum
931
4.4
3,7
L. rhamnosus GG
ATCC 53.103
4.6
4,0
L. rhamnosus
LB21
4,5
4.1
L. paracasei
F19
4.8
4,4
L. reuteri
PTA 5289
5.1
4,0
L. reuteri
ATCC 55.730
5.1
3,9
L. acidophilus
LA5
5.2
5.3
Discussie Ondernemingen De belangrijkste strategie voor cariës preventie is gebaseerd op het beïnvloeden van de her en demineralisatie processen, met name door gebruik fluoriden maar ook andere factoren betrokken bij het cariësproces kan worden gericht [19]. Een alternatief zou kunnen zijn om kolonisatie van cariës remmen van bacteriën en in dit aspect, probiotische bacteriën vormen een nieuw concept dat verder onderzoek nodig bevorderen. Deze in vitro
onderzoek uitgevoerd om het effect van acht commerciële probiotische lactobacilli stammen op groeiremming mutans streptococcen en C. albicans
vergelijken. We kozen deze specifieke lactobacilli stammen omdat zij in zuivelproducten, vruchtendranken, druppels, gruels, kauwgom en tabletten op de markt. Het testpanel van mutans streptococcen en gist bevatte zowel referentie en klinische isolaten. Candida albicans
is de meest algemeen geïsoleerde candida soorten in de mondholte en vormt tot 80% van de klinische isolaten [20]. Bovendien is candida toegeschreven significante voorspellende waarde voor cariës bij kinderen [21]. De meerderheid van de stammen lactobacilli werden volledig geïdentificeerd met biochemische analyse met de API 50 CH systeem, terwijl een bevredigende identificatie van de L
. reuteri Kopen en L. rhamnosus stammen
zou moleculair genetische methoden vereisen [22]. Ondernemingen De agar overlay werkwijze is geschikt voor de vraagstelling geacht omdat de werkwijze het remmende effect op verscheidene stammen kunnen testen op een enkele plaat . De werkwijze is eerder gebruikt om de in vitro
groeiremming van verschillende isolaten van lactobacilli aan pathogene bacteriën aangetoond in de vrouwelijke urogenitale gebied [23] en het remmende effect van alfa-hemolytische streptokokken op de otitis media pathogenen Streptococcus pneumoniae
, Haemophilus influenzae Kopen en Moraxella catarrhalis
[24]. Kõll et al [25] gebruikten de uitgestelde antagonisme methode om de remmende capaciteit tegen mutans streptococcen en C. albicans Electronics Test. In deze methode zijn de lactobacillen stab-geënt op het oppervlak van de bodem agar en pathogeen suspensies worden via macrocolonies lactobacillen gegoten. Na incubatie de breedte van de remmingszones worden gemeten. Het belangrijkste voordeel van de uitgestelde antagonisme methode is de meer exacte uitkomst, terwijl de agar overlay methode maakt beoordeling van de andere cel concentraties. Aldus kunnen de werkwijzen worden beschouwd als een aanvulling op elkaar.
Met uitzondering van L. acidophilus
, getoonde onderhavige probiotische stammen sterk remmend vermogen tegen zowel de referentiestammen en orale mutans streptococci isolaten en de resultaten waren vooral in overeenstemming met de recente waarnemingen van Simark-Mattsson en collega's [17]. De bevindingen met betrekking tot de candida stammen waren echter nieuw en vertoonden een nog groter verschil tussen de lactobacillen stammen en slechts drie van de acht geteste stammen vertoonden sterke remmende capaciteit. Deze resultaten waren het oneens te Kõll et al [25] die niet aan remming van Candida albicans
048 (wild-type) aan te tonen. Dit kan te wijten aan de werkwijze die voor de experimenten of dat de geteste Candida stam waren resistenter dan onze referentie en klinische isolaten. De productie van bacteriocines kunnen verschillend zijn in verschillende systemen en de mogelijkheid om diffunderen door de agar worden. Aangezien aanzienlijke groei remmen van verschillen tussen de probiotische lactobacilli werden genoteerd, werd de nulhypothese verworpen. Vertaald stamafhankelijke verschillen eerder waargenomen wat betreft de metabole capaciteit van zuren voedingssuikers vorm die sterk verschilt tussen verschillende probiotische stammen [26, 27]. Ondernemingen De uiteindelijke pH in het medium is voorgesteld als een belangrijke factor zijn voor groeiremming, hetzij rechtstreeks of door de productie van bacteriocines bij lage pH [28]. We vonden een soortgelijke tendens in de onderhavige experimenten; de lactobacilli stammen die de laagste pH veroorzaakt na incubatie waren ook het meest effectief in het remmen van MS en candida groei. De zwakste remming van zowel mutans streptococcen en C.albicans
werd getoond door L acidophilus
LA5 die ook de zwakste zuurproductie in beide systemen gehad. In de agar overlay werkwijze de lactobacilli wordt gekweekt in de MRS-agar en het is mogelijk dat dit systeem niet optimaal is voor L. acidophilus LA5
. De remmende werking kan verschillend zijn, ten goede of ten kwade, in andere testsysteem of in vivo
. Echter ook een aantal bacteriën vrij zwak zuurproductie, zoals L. reuteri
ATCC 55.730, bleek effectief tegen zowel mutans streptokokken en candida zijn. Dit wijst erop dat andere remmende stoffen kunnen ook worden betrokken bij het proces met H 2O 2 zijnde een van de belangrijkste metabolieten met remmende capaciteit tegen microbiële pathogenen [29]. Het belang van H 2O 2 productie gezondheid kan worden geïllustreerd in bacteriële vaginose, aangezien het ontbreken van lactobacilli met die productie lijkt te zijn geassocieerd met een veranderde samenstelling van de vaginale flora resulterend in een massieve anaërobe overgroei [30] . Tano et al. [31] geconcludeerd dat het remmende effect van alfa-hemolytische streptococci op otitis media pathogenen hoogstwaarschijnlijk werd veroorzaakt door de H 2O 2 productie. De antimicrobiële glycerolderivaat reuterine is een ander voorbeeld van een groeiremmende stof die door L. reuteri
[32] die betrokken kunnen zijn bij de reductie van mutans streptococcen in speeksel [14, 15] en gunstige invloeden op gingivitis [33 ] en ontstekingsmediatoren in gingival crevicular vloeistof [34]. Hoewel enige conclusie uit in vitro studies
voorzichtig moet worden gemaakt, onze bevindingen enige verdere steun voor de hypothese dat de probiotische lactobacilli homeostase en microbiële profiel in de mondholte beïnvloeden.
Conclusie
De onderhavige in vitro
studie toonde aan dat de commerciële probiotische lactobacilli groei van referentie stammen en mondelinge isolaten van mutans streptococcen en candida maar de aanzienlijk verschilde tussen de stammen capaciteit zou kunnen remmen. Verdere klinische studies zijn nodig om te controleren of de waargenomen verschillen een rol in de complexe orale biofilm kunnen spelen.
Verklaringen
Dankwoord
De studie werd ondersteund door subsidies van de County Council Västerbotten (TUA). We zijn dankbaar aan Professor Ingegerd Johansson die ons met de C.albicans
stammen.
Concurrerende belangen
De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen. Bijdragen
Authors '
PH bijgedragen met het laboratorium werk, de verwerving, analyse en interpretatie van de gegevens en nam deel aan het opstellen van het manuscript. MH bijgedragen met het ontwerp, laboratoriumwerk, analyse en interpretatie van de gegevens en nam deel aan het opstellen van het manuscript. ST droeg bij met het opstellen van het manuscript en de herziene kritisch. CSB bijgedragen met de analyse en interpretatie van gegevens, het opstellen van het manuscript en de herziene kritisch. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.
| | 