Abstracte achtergrond
Tijdens een onderzoeksproject over schimmel Candida
species bij patiënten die het dragen van obturator behandeld met radiotherapie voor hun terugkerende nasofarynxcarcinoom, we serendipitously observeerde de aanwezigheid van zwarte schimmel in twee opeenvolgende monsters van een patiënt.
Case presentatie
de monsters werden verzameld uit een 57-jarige Hong Kong man die gediagnosticeerd ongedifferentieerde type nasofarynxcarcinoom hebben . Hij werd behandeld met definitieve gelijktijdige chemoradiotherapie gevolgd door adjuvante chemotherapie en ontving toen een tweede gangen radiotherapie met IMRT. 18S rDNA sequentie onthulde dat de isolaten tot Exophiala dermatitidis
die gevoelig zijn voor fluconazol, itraconazol, ketoconazol en voriconazol was. Interessant E. dermatitidis
isolaten waren resistent tegen caspofungine en één isolaat was resistent tegen amfotericine B. Beide isolaten biofilms gevormd vergelijkbaar met die van Candida albicans
. Één isolaat van E. dermatitidis
toonde hemolysinefamilie en proteïnase vermogen vergelijkbaar met C. albicans
terwijl de andere isolaat niet. Was
Conclusie
wij voor het eerst meldde de ontdekking van een zwarte schimmel -E. dermatitidis
isolaten afkomstig van een patiënt met nasofarynxcarcinoom behandeld met radiotherapie. Deze isolaten bleken resistent tegen caspofungine, een belangrijke antischimmelmiddel voor systemische candidiasis zijn. Zo weinig bekend is over de zwarte schimmel in de klinische setting, is het belangrijk dat artsen moeten op de hoogte blijven van de nieuwe ontdekking op dit gebied.
Sleutelwoorden
Zwarte schimmel schimmelwerende gevoeligheid biofilm virulentie Chaminda Jayampath Seneviratne, Phoenix HL Fong en Victor HF Lee eveneens bijgedragen aan dit werk. achtergrond
Orale schimmelinfecties zijn niet gebruikelijk bij normale gezonde mensen. Evenwel opportunistische mycosen optreden bij individuen met immunosuppressie, bijvoorbeeld patiënten met HIV-infectie en AIDS en kankerpatiënten die chemotherapie en /of radiotherapie [1,2]. De incidentie van nasofarynxcarcinoom (NPC) is zeldzaam in de meeste delen van de wereld, maar het is endemisch onder Azië, met name in Zuid China inclusief Hongkong [3]. Radiotherapie is de standaard behandeling geweest voor een vroeg stadium NPC tijdens radiotherapie in combinatie met chemotherapie lokaal is gereserveerd voor en regionale geavanceerde niet-uitgezaaide ziekten [4]. De belangrijkste mondgezondheid tegenstander van NPC patiënten is de straling effect op de speekselklieren, wat resulteert in speeksel dysfunctie, xerostomie en orale mucositis die een belangrijke rol hebben gespeeld in de mondholte infectie en heeft bijgedragen aan Candida-infectie
[5,6]. Grote delen van de speekselklieren en mondholte onvermijdelijk lijden aan hoge stralingsdosis, vanwege de nabijheid van deze structuren aan de tumor. Vermeld is dat 50-80% ontwikkelden xerostomia in intensiteit gemoduleerde radiotherapie (IMRT), tot bijna 100% bij gelijktijdige chemotherapie gegeven [5]. Speeksel speelt een belangrijke rol in orale homeostase, moduleren de gezondheid van de mondholte. Speeksel immunoglobulinen zijn belangrijk voor de mondelinge verdediging, mucosale weefsels beschermen tegen microbiële infectie [7]. Daarom zijn deze patiënten zijn vooral gevoelig voor orale schimmelinfecties. Candida Kopen en Aspergillus Wat zijn de twee belangrijkste opportunistische schimmelsoorten [1]. Schimmelziekten veroorzaakt door andere soorten zoals Coccidiodes
, Histoplasma Wat zijn uiterst zeldzaam.
Exophiala dermatitidis
is een lid dat behoort tot de schimmel orde Chaetothyriales, die infecties kunnen veroorzaken bij zowel gezonde als immuungecompromitteerde personen [ ,,,0],8]. Chaetothyriales zijn de belangrijkste veroorzakers van menselijke phaeohyphomycosis en andere vormen van klinische patronen zoals chromoblastomycose [8,9]. E. dermatitidis
wereldwijd in de mens gemaakte omgeving hebt gevonden, zoals de baden in Azië en het publiek een Turks stoombad in Europa [10,11]. Het is bewezen oligotroof en thermofiele, en kan overleven in warme en vochtige omstandigheden [8].
Opgemerkt zij dat E. dermatitidis
wordt beschouwd als een opkomende systemische pathogenen in Zuidoost-Azië [8]. Fatal cerebrale en verspreid zwarte schimmel infecties zijn gemeld in China, en E. dermatitidis
was een van de verwekkers [12]. Voorheen E. dermatitidis
nooit gemeld te worden geïsoleerd van de mondholte bij de mens. In dit geval is, twee stammen van E. dermatitidis
werden geïsoleerd uit een obturator van een patiënt met NPC tijdens IMRT. We uitvoerig voerden een moleculaire analyse van de isolaten en gekenmerkt hun fenotypische gedrag, in termen van antifungale gevoeligheid, hemolysinefamilie en protease productie en de vorming van biofilm.
Case presentatie
Case
Een 57-jarige Hong Kong gentleman was gediagnosticeerd ongedifferentieerde type nasofarynxcarcinoom (NPC) (stadium III T2N2M0, AJCC 7e editie) ten Queen Marry Hospital, Hong Kong in maart 2008. Hij werd behandeld met definitieve gelijktijdige chemoradiotherapie gevolgd door adjuvante chemotherapie in september 2008. Hij werd afgerond gevonden om een lokaal recidief van NPC hebben in de neusholte uit te breiden tot de juiste ethmoid en kaakholte in augustus 2012. Craniofacial resectie en rechts maxillectomy werd uitgevoerd in oktober 2012. Pathologie rapport toonde terugkerende ongedifferentieerd carcinoom. Een orale noodoplossing werd op maat gemaakt voor het opvullen van de wond defect en facilitering van kauwen, slikken en orale voeding. Met het oog op positieve resectie marge werd postoperatieve chemoradiotherapie voorgesteld. Hij ontving toen een tweede gangen radiotherapie met IMRT met 60Gy de operatieve bed en 56Gy geleverd aan het hoge risico regio, al in 30 fracties gedurende 6 weken door de gelijktijdige versnelde radiotherapie (SMART) techniek gelijktijdig met 2 cycli van intraveneuze chemotherapie met cisplatine 100 mg /m
2 elke 3 weken.
Materialen en methoden
mondspoeling monsters
Deze patiënt werd uitgenodigd voor een studie uitgevoerd bij Department of Clinical Oncology, Queen Marry Hospital, de Universiteit van Hong Kong Hong Kong ter vaststelling van de gastheer en pathogeen kenmerken van orale candidiasis bij patiënten met NPC behandeld met IMRT. Schriftelijke toestemming is verkregen van de patiënt om deel aan de studie te nemen. Goedkeuring voor deze studie in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki van lokale institutionele review board van de Universiteit van Hong Kong werd verkregen voor aanvang te studeren. De patiënt werd gevraagd om de mond met 10 ml fosfaat gebufferde zoutoplossing (pH 7,3, 0,1 M) gedurende 1 min spoelen en spuwen in een steriele fles. De monsters werden vervolgens overgebracht naar de Oral Biosciences Laboratory, Faculteit der Tandheelkunde, de Universiteit van Hong Kong voor microbiologisch onderzoek. Patiënt werd gevraagd om gestimuleerd speeksel bij aanvang spuwen voorafgaand aan IMRT en vervolgens bij 2, 4, 6 en 8 weken na aanvang van IMRT. Mondspoeling monsters werden eerst gecentrifugeerd bij 13.200 rpm gedurende 10 minuten en de pellet werd opnieuw gesuspendeerd in steriel PBS, gevolgd door vortexen gedurende 30 seconden. Daarna werden monsters uitgeplaat op een Sabouraud dextrose agar (SDA, Gibco). De platen werden gedurende 48 uur bij 37 ° C.
Speciatie van de schimmelisolaten
De schimmel werd gesubkweekt op SDA om enkele kolonies, die vervolgens werden onderworpen Gramkleuring en uitgeplaat op CHORMagar voor speciatie verkrijgen. Vervolgens werden isolaten onderworpen aan commercieel beschikbare API 32C identificatiesysteem (BioMe'rieux, Marcy l'Etoile, Frankrijk).
Moleculaire identificatie
Om een nauwkeurige identificatie te maken, DNA van de zwarte schimmel monsters werd geëxtraheerd met behulp van de MasterPure ™ gist DNA-zuivering kit (Epicentre Biotechnologies, Madison, Wisconsin, VS) volgens de instructies van de fabrikant. Het geëxtraheerde DNA-monsters werden geamplificeerd met PCR met specifieke schimmel universele primers ITS3 en ITS4. De PCR amplificatie protocol bestond uit 30 cycli van denaturatie gedurende 1 minuut bij 94 ° C, hybridisatie gedurende 1 minuut bij 50 ° C en verlenging gedurende 2 minuten bij 72 ° C. Amplicons werden gecontroleerd door elektroforese op agarosegels kleuring met ethidium bromide. Vervolgens werd amplicon gezuiverd en onderworpen aan 18S rDNA sequencing bij Centrum voor Genome Research, de Universiteit van Hong Kong. DNA-sequentie werd doorzocht tegen NCBI database met behulp van standaard criteria voor een belangrijke wedstrijd.
Schimmelwerende gevoeligheid testen
De antifungale gevoeligheid van de isolaten werd geëvalueerd met behulp van de disk diffusie test na de CLSI M44-A richtlijn met bepaalde wijzigingen zoals we hebben eerder beschreven [13,14]. Vijf in de handel verkrijgbare antischimmelmiddelen werden geselecteerd voor deze studie: amfotericine B (AMPH), caspofungine (CASP5), fluconazol (FLUCZ), ketoconazol (KTC), itraconazol (ITRAC), en voriconazol (VOR.1) (Neo-Sensitabs, Rosco Diagnostica, Taastrup, Denemarken). Schorsingen die gelijk is aan 0,5 McFarland troebelheid van zuivere cultuur bereid waren. Twintig microliter van de suspensie werden geïnoculeerd op Mueller-Hinton agar door Spiraalentingen machine om een gelijkmatig verstoorde inoculatie bereiken. Tien microgram amfotericine B, 5-ug caspofungine, 25-gg fluconazol, itraconazol 10 ug, 15 ug-ketoconazool en 1-gg voriconazol schijven werden vervolgens op de geïnoculeerde agar. Platen werden aëroob geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 2 dagen. Dan de diameters van de groei remmingszones werden gemeten. De test werd uitgevoerd in duplo op twee verschillende gelegenheden.
Biofilmvorming geëvalueerd door XTT reductie assay
E. dermatitidis
biofilms werden ontwikkeld op basis van een eerder gepubliceerde protocol voor schimmel biofilms [15,16]. Kortom, kweek van E. dermatitidis
werd bereid door enten van een lusvol cultuur in gist stikstofbase (YNB, Difco) medium aangevuld met 50 mM glucose overnacht incubatie bij 37 ° C. De kweek werd tweemaal met 20 ml fosfaat-gebufferde zoutoplossing gewassen (PBS, pH 7,2, 0,1 M) door centrifugeren. De gewassen kweek werd geresuspendeerd in YNB medium aangevuld met 100 mM glucose en verkregen een suspensie gelijk aan McFarland 4 troebelheid. Honderd microliter van de suspensie werden toegevoegd aan elk putje van een steriele 96-well polystyreen microtiterplaat (Iwaki, Tokyo, Japan). Een rij van putjes die alleen het product zonder celsuspensie werd bereid als negatieve controle. De plaat werd gedurende 1,5 uur bij 37 ° C in een schudinrichting bij 75 rpm om de cellen te hechten aan het bronoppervlak (hechting fase). Dan de celsuspensie in elk putje werd afgezogen en gewassen met 100 ml PBS om niet-hechtende cellen te verwijderen. Tweehonderd microliter van YNB medium met 100 mM glucose werd toegevoegd aan elk van de putjes gewassen en werd de plaat geïncubeerd bij 37 ° C in een schudinrichting bij 75 rpm gedurende 48 uur. Ondernemingen De biofilmvorming werd geëvalueerd met behulp van een XTT reductie assay [15,17]. Een mengsel van 40 ml XTT (Sigma, St. Louis, MO) oplossing (1 mg /ml in PBS), 2 ml menadion (Sigma) oplossing (0,4 mM) en 158 ml PBS bereid. Na 48 uur groeifase werden alle celsuspensies afgezogen en gewassen met 200 ml PBS gedurende 3 keer. Tweehonderd microliter van PBS-XTT-menadion oplossing werden toegevoegd aan elk van de putjes gewassen en werd de plaat geïncubeerd bij 37 ° C in het donker gedurende 3 uur. Na de incubatie werd 100 ml oplossing uit elk putje overgebracht naar een nieuwe put en gemeten met een microtiter plaatlezer (SpectraMAX 340 Tunable Microplate Reader, Molecular Devices Ltd., Sunnyvale, CA) bij 490 nm
hemolysine assay <. br> hemolytische activiteit werd bepaald met het bloed plaat test zoals we eerder hebben beschreven voor andere schimmelsoorten [18]. In het kort, schorsingen met een entstof grootte van 10 8 cellen /ml zuivere cultuur bereid. Tien microliter van de suspensie werden gespot op Sabouraud dextrose agar aangevuld met 3% glucose en 7% verse schapenbloed (gew /vol; Merck, Darmstadt, Duitsland). Platen werden geïncubeerd bij 37 ° C in 5% CO 2 gedurende 48 uur. De kenmerkende doorschijnende halo rond de inoculum terrein zich positief hemolytische activiteit die werd gemeten met behulp van gecomputeriseerde beeldanalysesysteem (QWIN, Leica, UK). De intensiteit van de hemolysine productie door de schimmelsoorten werd vertegenwoordigd door hemolytische index (Hi), de verhouding verkregen door de diameter van de kolonie van de totale diameter van de kolonie en de doorschijnende halo. C. albicans
ATCC 90028 en C. parapsilosis
ATCC 22019 stammen werden respectievelijk gebruikt als positieve en negatieve controle van de hemolytische activiteit. De test werd in viervoud uitgevoerd op twee verschillende gelegenheden.
Proteinase assay
Bovine serum albumine (BSA) werd uitgevoerd voor het evalueren van de proteaseactiviteit, zoals we eerder beschreven [19]. Schorsingen gelijk aan McFarland 2 troebelheid van zuivere cultuur bereid waren. Tien microliter van de suspensie plaats geïnoculeerd in 1% BSA (w /v) agar plaat. Platen werden aëroob geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 5 dagen, gevolgd door gekleurd met zwarte naftaleen 1,25% oplossing in methanol /water 90% v /v gedurende 15 minuten en ontkleurd gedurende nog eens 36 uur met het veranderen van de oplossing. De diameter van de zone van proteolyse en de kolonie werd gemeten met geautomatiseerde beeldanalyse systeem (QWIN, Leica, UK). Protease productie (Pr d-waarde) werd verkregen door de diameter van de zone van proteolyse en de kolonie van de diameter van de kolonie. C. albicans ATCC 90028 en
C. parapsilosis
ATCC 22019 stammen werden gebruikt als respectievelijk positieve en negatieve controle proteïnaseactiviteit. De test werd in viervoud uitgevoerd op twee verschillende gelegenheden.
Resultaten en bespreking
Hoewel Exophiala Wat zijn milieu schimmels, de aanwezigheid in klinische monsters verzameld in twee opeenvolgende bezoeken, niet worden genegeerd als verontreiniging [20] . Zwarte schimmels zijn al tientallen jaren bekend, maar ze behoren tot de moeilijkste schimmel groepen te identificeren en dus de diagnostische verwarring was in het verleden gebruikelijke [8]. Door de vooruitgang van moleculaire technieken en beschikbaarheid van DNA-sequenties van verschillende loci met genen in sequentie databases, zoals GenBank, identificatie van Exophiala
tot soortniveau wordt mogelijk gemaakt. Eerder heeft Hong Kong meldde slechts een enkel geval van E. dermatitidis
geassocieerd met acute myeloïde leukemie 43 jaar oude vrouwelijke patiënt die perifere bloed stamcel transplantatie [20]. Er werd echter geïsoleerd van ontlasting.
In eerste instantie waren we op zoek naar Candida
species te herstellen van de monsters van deze patiënt. Echter, zagen we het optreden van abnormaal donkere kolonies op de SDA-platen. De duisternis van de kleur verhoogd wanneer de cultuur wordt steeds ouder en na enkele dagen verscheen als een "zwarte schimmel". Om reincultuur verkrijgen werden de zwarte schimmelkolonies verder gesubcultureerd op SDA voor de tweede ronde, die vervolgens werden onderworpen aan Gram vlek. Twee zwarte schimmels isolaten werden gevonden in twee van mondwater monsters respectievelijk werden ze genoemd als OM2 en OM4. OM2 en OM4 liet Gram-positieve cellen onder de lichtmicroscoop, 1000 × vergroting, waarvan de grootte, vorm en kleur zijn vergelijkbaar met C. albicans hotels met een aantal hyphal elementen. Vervolgens vergulde we het isolaat op CHORMagar naast Candida albicans Kopen en Candida parapsilosis
. Fungal isolaten behielden hun zwarte kleur op CHROMagar terwijl C. albicans
en C. parapsilosis
respectievelijk toonde klassieke groene en witte kleur (figuur 1). We hebben ook in dienst klassieke Candida
identificatie API 32C AUX methode die negatieve resultaten toonden. Figuur 1 speciatie van isolaten door CHROMagar. Reincultuur van C. parapsilosis Kopen en OM2 werden uitgestreken op dezelfde CHROMagar plaat (a). En zuivere cultuur van C. albicans Kopen en OM4 werden uitgestreken op een andere CHROMagar plaat (b). Beide OM2 en OM4 toonde donker bruine kleur op het bord, die hun donkere kleur werden behoud. Dan de kleuren van de kweken waargenomen en foto's werden genomen na 48 uur incubatie.
Verwijzing naar de resultaten van de schijf diffusie assay, beide zwarte schimmels isolaten waren resistent tegen caspofungine (tabel 1). Bovendien moet worden opgemerkt dat OM2 isolaat bestand tegen amfotericine B terwijl OM4 isolaat intermediair gevoelig was. Amfotericine B wordt beschouwd als de "gouden standaard" voor de behandeling van schimmelinfecties [21]. Derhalve fungale stammen die resistentie tegen amfotericine B zijn gegeven speciale aandacht. Echter, beide isolaten waren gevoelig voor het azool klasse van antimycotica nl.
Fluconazol, ketoconazol, itraconazol en voriconazol. Antifungale gevoeligheid van gegevens over de klinische E. dermatitidis
isolaten zijn nog steeds schaars, ondanks de vooruitgang in de testmethoden. In het algemeen Exophiala
soorten lijken gevoelig voor amfotericine B, triazool en terbinafine in vitro
. De klinische werkzaamheid van antischimmelmiddelen tegen bepaalde stammen van Exophiala
blijft controversieel omdat patiënten verlopen ondanks antifungale therapie [22]. Daarom correlatie van in vitro en in vivo resultaten reactie als gevolg van farmacokinetiek, gastheerfactoren blijft ontstaan van infecties en therapie te bepalen. Eén geval rapport toonde E. dermatitidis
te isoleren die resistent is tegen klasse van geneesmiddelen echinocandine: caspofungine, microfungin en anidulafungin, maar gevoelig voor azolen en amfotericine B [23]. Een andere studie van 43 isolaten van E. dermatitidis
toonde gevoeligheid voor amfotericine B, voriconazol, itraconazol, 5-fluorocytosine en terbinafine. Echter, deze studie toonde aan dat amfotericine B heeft een slechte activiteit tegen E. dermatitidis
[24]. Daarom is het raadzaam om antifungale gevoeligheid testen onmiddellijk uit te voeren wanneer E. dermatitidis
wordt verdacht als de ziekteverwekker in de menselijke infections.Table 1 Het resultaat van antifungale gevoeligheid testen van zwarte schimmels beoordeeld door disk diffusie test
Sample
Controle
Black schimmels
C. albicans
C. parapsilosis
OM2
OM4
AMPH
ØMean
14.8
S
12.5
I
9.3
R
12,3
I
Bereik
13-16
12-13
9-10
12-13
CASP5
ØMean
15.5
S
18
S
NA
R
NA
R
Range
14-17
17-19
NA
NA
FLUCZ
ØMean
50,8
S
36,5
S
25,3
S
30
S
Range
50-52
35-38
25-26
29-31
KETOC
ØMean
53,5
S
52
S
56,3
S
59,7
S
Bereik
53-54
51-53
56-57
5,9-6
ITRAC
ØMean
22
S
18,5
S
25.7
S
26,3
S
Range
21-23
18-19
25-26
26-27
VOR. 1
ØMean
52,5
S
45,5
S
52,3
S
53,7
S
Range
51-54
44-47
52- 53
53-54
ØMean = zone in mm; AMPH - Amfotericine B (Resistant: & lt; 10 mm; Intermediate: 10 mm - 14 mm; Vatbaar: ≥15 mm), CASP5 - Caspofungine (Resistant: ≤12 mm; Intermediate: 13 mm - 15 mm; Vatbaar: ≥16 mm ), FLUCZ - Fluconazol (Resistant: ≤14 mm; Intermediate: 15 mm - 18 mm; Vatbaar: ≥19 mm), KTC - Ketoconazol (Resistant: ≤20 mm; Intermediate: 21 mm - 27 mm; Vatbaar: ≥28 mm ), ITRAC - Itraconazol (Resistant: & lt; 13 mm; Intermediate: 14 mm - 22 mm; Vatbaar: ≥23 mm), VOR. 1 - Voriconazol (Resistant: ≤13 mm; Intermediate: 14 mm - 16 mm; Vatbaar: ≥17 mm); R-resistente, I-tussenproduct, S-gevoelig. Ondernemingen De resultaten van XTT reductie assay bleek dat de zwarte schimmels, OM2 en OM4 konden biofilm (tabel 2, figuur 2) te vormen. Derhalve volgens de XTT lezing E. dermatitidis
vormen vergelijkbaar biofilm zo goed als C. albicans
SC5314. biofilmvorming staat bekend als een belangrijke virulentie attribuut rechtstreeks verband houden met negatieve uitkomst van de Candida
infections.Table 2 Het resultaat van XTT vermindering test en de hemolysine en proteinase activiteit van zwarte schimmels
XTT
hemolysinefamilie
Proteinase
Sample
Abs Mean
Range
Hi Mean
Range
Pr d Mean
Range
Controle
C. albicans
1.92
1,73-2,09
1,73
1,43-2
1,94
1,83-2,07
C` parapsilosis
1.68
1,51-1,94
1,14
1,1-1,13
NA
NA
Black fungi
OM2
2.03
1.8-2.36
2.33
2.22-2.55
NA
NA
OM4 Gids 2.15
1,91-2,43
NA
NA
NA
NA
Abs = extinctie; Hi = hemolysine index; Prd value = protease productie-index.
Figuur 2 XTT vermindering test van zwarte schimmels na 3 uur incubatie. De duisternis van een oranje kleur vertegenwoordigde de hoeveelheid biofilm. OM2 en OM4 vertoonde een sterke oranje kleur na 3 uur incubatie in XTT reductie assay, die zo sterk als C. albicans Kopen en sterker dan C. parapsilosis
was. De oplossing in elk putje werd gemeten door microtiter plaatlezer en de resulterende absorptiewaarden werden in Tabel 2.
Het is duidelijk voor de hemolyse van schapen- bloed agar geïnduceerd door E. zie dermatitidis
OM2 isolaat (Figuur 3a ). Er was een opvallende doorschijnende halo rond de entstof site die de positieve hemolytische activiteit laten zien. De hemolytische index (Hi) was net zo hoog als die van C. albicans
. Integendeel, E. dermatitidis
OM4 isolaat kromp hemolysine activiteit (figuur 3b). Het is een onverwacht resultaat aangezien beide isolaten van één patiënt werden gewonnen op dezelfde plaats. IJzer speelt een belangrijke rol bij de overleving van een invasieve pathogenen zoals C. albicans
in de menselijke gastheer. Daarom invasieve pathogenen vereist hemolysinefamilie enzymen ijzer indirect extraheren door lyseren-ijzerhoudende eiwitten zoals hemoglobine. Echter, exacte klinische implicaties van deze bevindingen nog niet volledig opgehelderd. Figuur 3 foto's waarop de hemolyse van schapen- bloed agar geïnduceerd door de zwarte schimmels. Picture a en b tonen de hemolysine activiteit van OM2 en OM4 respectievelijk. Tien microliter cultuur schorsing werden gespot op de slaap bloed agar plaat. De plaat werd waargenomen en de diameter van de halo werd gemeten na 2 dagen incubatie. Een onderscheidend doorschijnende halo rond de entstof site is weergegeven in een, waarvan is aangetoond positieve hemolytische activiteit van OM2. Nr halogeen te zien in b en daarom OM4 werd geacht geen hemolytische activiteit.
Conclusies
Concluderend hebben we gemeld het eerste geval van isolatie van E. dermatitidis
soorten uit de menselijke mondholte. Bovendien hebben we ook geproduceerd baanbrekende gegevens over de virulentie zoals attributen zoals biofilmvorming, hemolysinefamilie en proteinase test. Van de nota, één van deze E. dermatitidis
isolaten was resistent tegen caspofungine en amfotericine B, de twee beste antimycotica beschikbaar zijn in de markt voor systemische schimmelinfecties. Deze bevinding gerechtvaardigd verdere klinische studies over deze opkomende pathogene schimmel, met name onder de groeiende hoeveelheid van de immunogecompromitteerde bevolking waaronder patiënten met NPC.
Toestemming
schriftelijke toestemming is verkregen van de patiënt voor de publicatie van deze zaak verslag en eventuele begeleidende afbeeldingen. Een kopie van de schriftelijke toestemming is beschikbaar voor beoordeling door de redacteur van dit tijdschrift.
Notes
Chaminda Jayampath Seneviratne, Phoenix HL Fong en Victor HF Lee eveneens bijgedragen aan dit werk.
Verklaringen
Dankwoord
Dit werk werd ondersteund door het Fonds voor onderzoek inzake de bestrijding van infectieziekten, Food and Health Bureau, Hong Kong SAR regering: 11100722.
Competing belangen Ondernemingen de auteurs verklaren dat zij geen concurrerende belangen
. auteurs bijdragen
CJS en VHFL bedacht en ontwierp de studie. VHFL voerde de monstername. PHLF voerde de experimenten. CJS, PHLF, SSWW analyseerde de gegevens. CJS, PHLF, SSWW en VHFL schreef het manuscript. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.
