ABSTRACTTitle:. Werkzaamheid van Alcohol-Free Chloorhexidine in het verminderen van de niveaus van Streptococcus mutans
Doel: De antimicrobiële eigenschappen van Alcohol-Free chloorhexidine vergelijken met andere antimicrobiële mond spoelen
Methods. Streptococcus mutans (GS5 stam) werd gekweekt op agar, en opnieuw gesuspendeerd in een steriel kweekmedium trypticasesoja bouillon (TSB) aangevuld met gistextract. Vier unieke experimenten werden uitgevoerd elke toevoeging de inocula van de bacteriesuspensie naar test antimicrobiële agentia
. Resultaten: Experiment # 1: De groei van S. mutans werd volledig geremd bij 5% en 1% concentratie alcoholvrij chloorhexidine (AFC) en alcohol bevattende chloorhexidine (CHX). Bacteriële groei deed zich voor in alle andere verdunningen met de meest opmerkelijke in 1% Biotene & reg; (OD max = 1.383 nm), gevolgd door 0,01% Biotene & reg; (OD max = 1.328). Het grootste verdubbeling tijd was 0,01% CHX bij 2,1013 hr
Experiment # 2:. Generation tijd en OD max waren gelijk voor alle verdunningen van de verschillende reagentia
Experiment # 3:. 5 Minute kort -termijn blootstelling onverdunde CHX remde de groei van S. mutans. AFC geremd bacteriegroei gedurende 6 uur. De OD max en een verdubbeling van de tijd waren 1,288 en 1,1213 uur respectievelijk. De OD max en generatie tijd voor Biotene & reg; waren 0,891 en 1,5516 hr respectievelijk
Experiment # 4:. 5 minuten kortdurende blootstelling onverdunde CHX en AFC remde de groei van S. mutans. Bacteriële groei deed zich voor in alle andere verdunningen met de meest opmerkelijke in volle kracht Biotene & reg; (OD max = 1.629), gevolgd door 1% ethanol (OD max = 1.598). De grootste verdubbelingstijd was 5% ethanol bij 1.706 hr
Conclusies:.. Alcoholvrij Chloorhexidine is effectief in het onderdrukken van bacteriële groei van S. mutans en is daarom een alternatief voor alcohol-bevattende Chloorhexidine
INTRODUCTIONAntimicrobial mond-spoeloplossingen worden in veel klinische situaties voor zowel profylactische als therapeutische doeleinden (1). Meer specifiek zijn mond spoelen een belangrijke aanvullende procedure om goede mechanische mondhygiëne of het voorkomen van infecties na bacteriën intraorale chirurgische procedures of immunosuppressie worden door straling naar het hoofd /neck.1,4,5
< p> Chloorhexidine gluconaat (CHX), een breed-spectrum antibacterieel middel, is een van de meest gebruikte antiseptische middelen in uitgebreide tandheelkundige care.5 effectief tegen zowel Gram-positieve en Gram-negatieve micro-organismen, schimmels en sommige virussen, het is geweest aangetoond dat plaquevorming te remmen, te verminderen tandvleesontsteking en bovendien voorkomen tandheelkundige caries.3,5, in oraal gebruik, CHX is vrij van systemische toxiciteit, en microbiële weerstand of veranderingen van de mondelinge microbiota niet echter occur.8,11, de langdurige gebruik van CHX beperkt wordt door de ontwikkeling van extrinsieke tand en tong verkleuringen, alsmede veranderingen in smaak toonaangevende patiënt compliance.2,3,5,7,9,11 verminderde derhalve de meeste tandartsen niet lang aan -termijn dagelijks gebruik van CHX als een mond-rinse.11 Gingival schilfering en pijnlijke slijmvliezen zijn ook gemeld bij ernstige cases.1,5
de huidige literatuur ondersteunt het dagelijks gebruik van 0,12% of 0,2% CHX als antiseptische agenten. Echter een bijkomende beperkende factor is die routinematig gebruikt chloorhexidine mond spoelen alcohol bevatten, die pijn, irritatie kan veroorzaken en nadelig zijn voor patiënten met mucositis, patiënten die hoofd /nek bestralingstherapie, jonge kinderen, immunogecompromitteerde patiënten of herstellende alcoholisten. Mogelijke nadelige effecten van alcohol bevattende CHX mond spoelen geleid tot het formuleren van een nieuw alcoholvrij 0,12% CHX (AFC) mond-rinse.1,2,11
Biotene & reg; is een alcoholvrije mond spoelen dat veel van de symptomen van stralingsgeïnduceerde xerostomie kunnen verbeteren. Het werkt door het produceren van een antimicrobieel enzymsysteem in de mondholte, dat de celwanden van plaque vormende bacteriën doordringt, vernietigen ze gewoon gingivale de gumline.12 Dit enzym bestaat uit aangeboren menselijke speeksel verdedigingseiwitten; lysozym, lactoferrine en peroxidase. Lactoferrine is een ijzerbindend glycoproteïne dat bactericide werking vertoont tegen diverse bacteriën in ijzervrije vorm apo-LF en bacteriostatisch tot ijzer sequestration.6,10
Zowel AFC en Biotene & reg; zijn commercieel verkrijgbaar antimicrobiële middelen toegepast mondhygiëne verbeteren en voorkomen bacteriële infectie. Er zijn echter weinig studies gericht op de effectiviteit van AFC als een levensvatbare antimicrobiële mond spoelen.
Het doel van dit onderzoek was om de antimicrobiële eigenschappen van Alcohol-Free Chloorhexidinegluconaat vergelijken met andere antimicrobiële mond spoelen.
methoden en materialen
soorten bacteriën Optical Densiteitmetingen:. Al organismen groeien ze verhogen de troebelheid hun groeimedium. Door het meten van de troebelheid van het medium na verloop van tijd een extinctie curve kan worden gegenereerd. De curve weerspiegelt de groei (verhoogde concentratie) van het organisme van belang BIOSCREEN VOORBEREIDING:. In het eerste experiment vier verdunningen, 5%, 1%, 0,1% en 0,01% in TSB, elk van de AFC, CHX en Biotene & reg; zijn gemaakt. Dezelfde verdunningen werden gemaakt met gedestilleerd water als controle. De inocula van de bacteriële suspensie werden de verdunde reagentia toegevoegd en kort gewerveld. De tweede experiment testte de blootstelling van twee verdunningen, 5% en 1% in TSB, elk AFC, CHX en Biotene & reg kort ;. Een 5% verdunning werd gemaakt met gedestilleerd water als controle. Inoculanten (1000 pi) van de bacteriële suspensie werden gedurende 1 minuut bij 13 ~ 000 rpm. Het testen reagentia (1000 pi) toegevoegd aan de bacteriepellet en gevortext. Alle verdunningen werden gelaten om bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten. Elk werd vervolgens gecentrifugeerd, gevolgd door reagens verwijdering MTSB wassen, vortex en centrifuge. De pellet gevormd werd vervolgens gesuspendeerd in 1000 ul MTSB en gewerveld De reagentia in het derde experiment werden onverdund (100%) oplossingen van AFC, CHX, Biotene & reg.; en gedestilleerd water. In het vierde experiment waren onverdunde oplossingen van AFC, CHX, Biotene & reg; en gedestilleerd water en vier verdunningen, 1%, 5%, 11,6% en 15%, elk alcohol. In beide studies inocula (1000 pi) van de bacteriële suspensie werden gedurende 1 minuut bij 13 ~ 000 rpm. Het testen reagentia (1000 pl) werden vervolgens aan de bacteriële pellet, gewerveld en verdunningen werden gelaten om bij kamertemperatuur gedurende 5 minuten. Elk werd vervolgens gecentrifugeerd, gevolgd door reagens verwijdering MTSB wassen, vortex en tenslotte gecentrifugeerd. Dit werd vervolgens herhaald, het invullen van een tweede maal spoelen met MTSB, een laatste centrifuge en ten slotte, de schorsing in 1000 ul MTSB. De laatste bioscherm voorbereiding in experimenten 1, 2, 3, en 4 bestonden uit porties (200 uL) van de bacteriën in combinatie met de orale mond spoelen, AFC, CHX, Biotene & reg ;, gedestilleerd water en TSB in honingraat putjes (fig. 2) geplaatst waardoor respectievelijk 90, 40, 25 en 45 monsters. Elke hoeveelheid werd vijf maal verstrekt, in verschillende putjes, om de uniformiteit en reproduceerbaarheid te waarborgen. Minerale olie, (0,1 ml) druppels werden daarna gedispenseerd in elk putje om verdamping te voorkomen. De honingraat putjes werden vervolgens in de Bioscreen Analyzer Microbiologische groei gedurende 24 uur bij een brede band golflengtebereik van 420 nm tot 580 nm voor veranderingen in optische dichtheid controleren. Groeicurven en verdubbelingstijd werden vervolgens berekend RESULTSExperiment # 1: De groei van S. mutans werd volledig geremd bij 5% en 1% concentratie AFC en CHX (figuren 3 & amp; 4).. De bacteriën werden gedood en geen significante veranderingen in optische dichtheid (OD) werden genoteerd. Onder dezelfde omstandigheden, bacteriegroei vond plaats in alle andere verdunningen (Figuren 5 & amp;. 6). De meest opvallende groei vond plaats in de 1% Biotene & reg; verdunning met een OD max = 1,383 en een verdubbeling tijd (Td) = 1,4734 uur. Dit werd gevolgd door 0,01% Biotene & reg; verdunning met een OD max = 1,328 en een Td = 1,3053 uur. Het grootste verdubbeling tijd was 0,01% CHX op 2,1013 uur. De verdunningen van AFC en CHX mond-spoelingen die niet effectief bij het remmen van de groei van bacteriën waren hadden een buitendiameter van ongeveer 1,3 nm, die vergelijkbaar zijn met de OD van Biotene & reg was; en de controles Experiment # 2. Generatietijd en OD max waren vergelijkbaar voor alle verdunningen van de verschillende reagentia. Groei begon ongeveer twee uur voor elke verdunning. Er lijkt een aantal groeiremming vergeleken met de initiële incubatie experiment zijn echter reagentia waren niet doeltreffend, en bacteriën nog groeiden (Figuur 7). Experiment # 3. De besturing, H2O en TSB, heeft de bacteriën niet te doden en ook niet Biotene & reg; met een OD max en generatie tijd van 0,891 en 1,5516 uur, respectievelijk. Kortdurende blootstelling van onverdunde CHX volledig geremd groei van S. mutans. AFC remde SM bacteriegroei zes uur, waarna er bleek bacteriële groei. De OD max en een verdubbeling van de tijd waren 1,288 en 1,1213 uur, respectievelijk. De OD max en generatie tijd voor Biotene & reg; waren 0,891 en 1,5516 uur respectievelijk (Fig.8) Experiment # 4:. Vijf minuten blootstelling van onverdunde AFC en CHX korte termijn remde de groei van S. mutans. Bacteriële groei deed zich voor in alle andere reagentia en verdunningen van alcohol met de meest opmerkelijke groei die zich in onverdunde Biotene & reg; (OD max = 1.629), gevolgd door 1% ethanol (OD max = 1.598). Het grootste verdubbeling keer was 5% ethanol bij 1.706 uur (Fig.9). DISCUSSIONThe observaties en de resultaten van dit onderzoek suggereren dat alcohol-vrij chloorhexidine is een effectieve mond-spoelen in het onderdrukken van de groei van S. mutans . Het eerste experiment testte de groei van bacteriën in de aanwezigheid van verschillende verdunningen (5%, 1%, 0,1%, 0,01%) van de geteste reagentia. Uit het eerste experiment werd waargenomen dat zo laag als 1% AFC en CHX effectief waren in het remmen van de groei van de bacteriën. Biotene & reg; remden microbiële groei en het resultaat van de controle, gedestilleerd water en MTSB waren zoals verwacht, niet doden opgetreden. Na de eerste proef, de tweede bestond uit het onderzoeken van de resultaten van het blootstellen van bacteriën tot 1% en 5% verdunningen van antimicrobiële mondspoelmiddelen gedurende 30 minuten. Generatietijd en OD max waren gelijk voor beide verdunningen van de verschillende reagentia. Bovendien bleek er enige groeiremming vergeleken met het aanvankelijke incubatie experiment de groei van de bacteriën werd vertraagd te zijn. Echter, de reagentia waren niet effectief, en de S. mutans nog steeds groeide. Het is de bedoeling voor de derde experiment was om een meer klinische situatie te simuleren. De S. mutans werden blootgesteld aan de onverdunde antimicrobiële mond-spoelen, AFC, CHX, Biotene & reg ;, en gedestilleerd water gedurende 5 minuten. Het onverdunde alcohol bevattende CHX volledig remde de groei van S. mutans. Omgekeerd remde de AFC bacteriegroei gedurende 6 uur, waarna er bleek de groei van bacteriën. Op dit punt, besmetting van andere microbiota werd ervan verdacht in de AFC mond spoelen. Daarom werd het experiment herhaald. Bovendien, of alcohol een verstorende variabele moest worden bepaald. Deze vierde onderzoek is gebleken dat na blootstelling 5 minuten tot onverdund antimicrobiële mond spoelen en verschillende verdunningen van alcohol was geen bacteriegroei in zowel de AFC reagens of CHX reagens. Bovendien heeft de alcohol verdunningen niet de groei van S. mutans remt Hoewel de laatste onderzoek is gebleken dat er geen verschil in effectiviteit tussen de AFC en alcoholhoudende CHX verdere studies nodig.; (1) het verschil in de formulering en bepalen (2) de mechanismen die de remming van de bacteriën tussen de AFC en alcohol bevattende CHX; en om te testen klinisch als bevestig de consistentie van de weergegeven in deze studie resultaten. Huidige gegevens blijkt dat er slechts één klinisch onderzoek aantonen van de effectiviteit van AFC met betrekking tot plaque inhibitie. De resultaten van deze studie waren in overeenstemming met dit één Bij het vergelijken van Yokoyama & rsquo;. S-studie (2009), Biotene & reg; bleek effectief in het remmen van de groei van actinobacillus actinomycetemcomitans, een andere bacteriesoorten zijn. Echter, in dit onderzoek was het niet effectief tegen S. mutans. Misschien Biotene is effectief tegen bacteriële soorten die voornamelijk anaerobe en subgingivaal gevonden zijn. Als dit het geval was, kan men stellen dat Biotene beter zou worden geserveerd als een antibacteriële mond-spoelen voor parodontale aandoeningen, terwijl moet CHX mond-spoelen voornamelijk gereserveerd voor cariës preventie. CONCLUSION1) Alcohol-Free chloorhexidine is effectief in het onderdrukken van bacteriële groei van S. mutans en is daarom een alternatief voor alcoholhoudende chloorhexidine. 2) alcohol niet bijdraagt aan de antimicrobiële eigenschappen van Chlorhexidine.OH Rebecca Cohen, DDS, Paed Cert, FRCD (C), klasse van 2011; Faculty Advisor, Casey Chen, BDS, PhD, DDS Met dank aan: dr. Casey Chen voor zijn aanmoediging en Jason Jee en Christine Hwang voor hun hulp en steun. Dit onderzoek papier is in een gedeeltelijke vervulling van de vereisten zijn ingediend voor de voltooiing van het Advanced Pediatric tandheelkunde Program aan de Herman Ostrow School of Dentistry van de USC. REFERENCES1. Bolanowski SJ, Gescheider GA, Sutton SV. Relatie tussen orale pijn en ethanol concentratie in mondspoelmiddelen. J parodontale Res 30: 192-197, 1995. 2. Eldridege et al. Werkzaamheid van een alcoholvrije mondspoeling chloorhexidine als antimicrobieel middel. De journ van Pros Dent 80 (6): 685-690, 1998. 3. Flotra L, Gjermo P, Rolla G, Waerhaung J. Bijwerkingen van chloorhexidine mond wast. Scan J Dent Res 79: 119-125, 1971. 4. Gunsolley JC. Klinische werkzaamheid van antimicrobiële mondspoelmiddelen. Tijdschrift voor Tandheelkunde 38: S6-S10, 2010. 5. Kocak MM, Ozcan S, S kocak, Topuz O Erten H. Vergelijking van de werkzaamheid van drie verschillende oplossingen mondspoeling het verminderen van het niveau van streptococcus mutans in het speeksel. Eur J Dent 3: 57-61, 2009. 6. Lassiter MO, Newsome AL, Sams LD, Arnold RR. Karakterisatie van lactoferrine interactie met Streptococcus mutans. J Dent Res 66: 480-485, 1987. 7. Loe H, Schiøtt CR. Het effect van mondspoelmiddelen en topische toediening van chloorhexidine op de ontwikkeling van plaque en gingivitis bij de mens. J Perio Res 5: 79-83, 1970. 8. Screenivasan P, Gaffar A. plaque biociden en bacteriële resistentie: een overzicht. J Clin Periodontol 29: 965-974, 2002 9. Smith RJ, J Moran, Addy M, Dohery F, Newcombe RG. Vergelijkende kleuring in vitro en plaque remmende eigenschappen in vivo van 0,12% en 0,2% chloorhexidine mondspoelingen. Journal of Clin Perio. 22 (8): 613-617, 1995. 10. Tenovuo, J. Klinische toepassingen van antimicrobiële gastheereiwitten lactoperoxidase, lactoferrine en lysozyme in xerostomie: werkzaamheid en veiligheid. Mondziekten 8: 23-29, 2002. 11. Van Strydonck DAC, Timmerman MF, van der Velden U, van der Weijden GA. Plaque remming van twee commervcally beschikbaar chloorhexidine mondspoelmiddelen. J Clin Periodontol32: 305-309, 2005. 12. Warde et al. Een fase II studie van Biotene bij de behandeling van postradiatie xerostomie bij patiënten met hoofd- en nekkanker. Suppor Care Cancer 8: 203-208, 2000. Bioscreen Referenties 1. D & rsquo; Arrigo M, Garcia de Fernando GD, Velasco de Diego R, Ordonez JA, George SM, Pin C. Indirecte meting van de vertraging verdeling van enkele cellen van Listeria innocua in de voeding. Appl Environ Microbiol 72: 2533-8, 2006. 2. Francois K, Devlieghere F, Standaert AR, Geeraerd AH, Cool I, Van Impe JF, Debevere J. Milieu factoren die de relatie tussen de optische dichtheid en celgetal voor Listeria monocytogenes. J Appl Microbiol 99: 1503-1515, 2005. 3. Metris A, George SM, Baranyi J. gebruik van optische detectiedichtheid keer het effect van azijnzuur op eencellige kinetiek beoordelen. Appl Environ Microbiol 72: 6674-6679, 2006. 4. Murakami C, Kaeberlein M. kwantificeren gist chronologische levensduur met uitgroei van oude cellen. Jupiter. 27. http://www.jove.com/index/Details.stp? ID = 1156, doi: 10,3791 /1156
: de geselecteerd voor deze studie bacteriën gevonden mondeling in het speeksel, zacht weefsel oppervlakken en binnen de tandheelkundige biofilm; Streptococcus mutans (GS5 stam)
Micro-organismen groei kan worden gemeten door de Bioscreen C Automated Groei Curve Analysis System (afb. 1). Bioscherm C is een computergestuurde incubator /lezer /shaker. Het heeft 8 filters die variëren van 405 nm tot 600 nm met een brede-band filter en gebruikt een honingraat microplaat veranderingen in optische dichtheid versus tijd microbiologische groeicurves meten.
Vier unieke experimenten werden uitgevoerd testen van 0,12% alcohol-vrij chloorhexidine (AFC), 0,12% Chloorhexidinegluconaat (CHX) en Biotene & reg ;, orale mond spoelen. Bacteriële reagentia werden gefiltreerd met 0.22mm microporiefilter. Gedestilleerd water werd gebruikt als negatieve controle, terwijl een steriel kweekmedium trypticase soja bouillon (TSB) aangevuld met gistextract, werd gebruikt als positieve controle. S. mutans (SM GS5 stam) werd gekweekt op 1,5% van trypticasesoja bouillon aangevuld met 0,3% gistextract, 0,75% Bacto-agar en 2,5% door warmte geïnactiveerd paardenserum en gedurende 24 uur bij 37 & deg; C. Verse MTSB (900 uL) geënt met de bacteriën (100 uL) en de suspensies werden toegevoegd aan de test microbiële agentia en gedestilleerd water.
.