Tandheelkundige gezondheid > Oral Problemen > Oral Medicine > Mondziekten > Procedure voor autoloog trombine Activering van bloedplaatjes in bloedplaatjesrijk plasma (PRP)

Procedure voor autoloog trombine Activering van bloedplaatjes in bloedplaatjesrijk plasma (PRP)

 

ACHTERGROND

Bloedplaatjes zijn kleine kernloze gegranuleerd lichamen die zich, aggregaat en vormen een plaatjesprop op plaatsen van vasculaire verwonding bloedverlies te voorkomen. Concentratie van bloedplaatjes in bloed is ongeveer 300.000 /ul, en ze hebben doorgaans een halfwaardetijd van 4 dagen. Ze zijn gevormd uit gecommitteerde gigantische stamcellen genaamd megakaryocyten als ze knijpen stukjes van hun cytoplasma en extruderen ze in de bloedsomloop. Bloedplaatjes hebben microtubuli rond hun omtrek en een uitgebreid gekeerde membraan in contact met de extracellulaire vloeistof.

De membranen bevatten receptoren voor een aantal stoffen waaronder collageen, adenosine difosfaat (ADP), von Willebrand factor en fibrinogeen. Sommige van de inhoud van hun cytoplasma vinden hun oorsprong in de megakaryocyten, sommige intern gesynthetiseerd en sommige worden opgeslagen nadat endocytose. Onder de intracellulaire organellen zijn twee soorten korrels:

1) dichte korrels, die nonprotein stoffen, die worden uitgescheiden in reactie op bloedplaatjes activering, waaronder serotonine bevatten, ADP /ATP, histamine, dopamine en catecholamines.1

2) * -granules, die proteins.1-3 bevatten uitgescheiden Onder deze opgeslagen eiwitten zijn mitogene en angiogene groeifactoren die essentieel zijn voor hard en zacht weefselregeneratie en reparatie zijn. Marx4 van Noord-Amerika en Anitua et AL1 van Europa blijkt dat minder en grotere botdichtheid in operatieplaatsen behandeld met PRP wordt verkregen in vergelijking met controleplaatsen. De groeifactoren in bloedplaatjes-bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF), transformerende groeifactor (TGF), vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF), van bloedplaatjes afgeleide epidermale groeifactor (PDEGF) en insuline achtige groeifactor-1 (IGF-1). Deze worden op verschillende manieren betrokken bij het stimuleren van chemotaxis, celproliferatie en rijping in wond healing.1

In het begin van 1990 bloedplaatjes rijk plasma (PRP) werd geïntroduceerd als een autologe biomaterial.5,6 Een verscheidenheid aan machines zijn toegesneden de optimale centrifugale scheiding van PRP voor therapeutisch gebruik bereiken van kleine hoeveelheden gecitreerd blood.7-13

In 2002, Gonshor9 een werkwijze gekenmerkt door een dubbelrotatiefilter centrifugatie methode met een niet-geautomatiseerde centrifuge sekwestreren ontwikkeld bloedplaatjes concentraat tot een niveau 4-8 keer uitgangswaarde volbloed waarden. De techniek geproduceerde concentratie van PDGF-AB boven 500% en TGF groter dan 800%. Zijn test toonde aan dat de opbrengst 85,1% bloedplaatjes bleef rustig in de hele procedure, met behoud van hun integriteit en levensvatbaarheid, zonder onbedoelde activering. Rundertrombine 5000 eenheden en 10% calcium chloride-oplossing werden gebruikt voor bloedplaatjes activering, het creëren van een PRP gel.

In 2005 Marx en Garg15 publiceerde een uitstekend boek over 'Dental en Craniofacial Toepassingen van Bloedplaatjes-Rich Plasma ". In deze tekst de auteurs stellen dat "groeifactoren naar voren zijn gekomen als de 'heilige graal' in de wond-healing 'en ze geprojecteerd gevriesdroogd bovine trombine voorbereiding als de standaard voor het initiëren van stolling van de PRP en het activeren van bloedplaatjes.

Maar een jaar eerder in 2004, werd rundertrombine niet beschikbaar in Canada. Deze gebeurtenis veroorzaakte een zoektocht naar een alternatief voor runderen trombine. Autologe trombine en /of recombinant humaan trombine daarna de logische keuze. Noodzaak Daarom werd de moeder van de uitvinding, en een zoektocht gestart naar een alternatief.

ONDERWERPEN

Deze studie bestond uit 21 patiënten die een implantaat stages en /of bottransplantatie nodig. Van de 21 patiënten 5 nodig onmiddellijke implantatie met bottransplantatie, op slechts 8 nodig plaatsing van het implantaat, en 8 nodig bot alleen enten.

Materialen en werkwijzen

Materials

1) algemeen doel centrifuge (niet-geautomatiseerde) met een zes-positie rotor, of geautomatiseerde centrifuge.

2) 4 -10ml geel-top vacutainers bevattende zuur citraat dextrose (ACD-a) oplossing.

3) 6 -10-ml noncoagulant rood-top vacutainers

4) 21 -.. gauge vlindernaald en 19 gauge vlindernaald

5) 21/2 "(63mm) stompe naald .

6) 3 "(76mm) stompe naald.

7) 10% calciumchloride-oplossing.

8) 6- 5 ml steriele spuiten.

9) 6 -... 1 ml steriele spuiten

10) steriele container voor PRP

11) steriele container voor PPP

12) steriele container voor serum

13) 4 steriele Dappen gerechten.

14) Pakket van steriele collageen membraan. (Colla Tape of Neo Tape)

15) Reageerbuisrek.

Blood inzameling en verwerking

Buizen van bloed werden uit de antecubitale regio genomen met een 21-gauge of 19 gauge vlindernaald en verzameld in 4-10ml geel-top bloedafnamebuisjes met zuur citraat dextrose (ACD-A) oplossing. Twee extra buisjes bloed werden verzameld zoals hierboven beschreven, behalve in 10 ml rode-top vacutainers zonder antistollingsmiddel. (Beide rode-bovenbuizen werd aangegeven met een X) (fig. 1). De vier gele-top buisjes bloed werden verwerkt tot PRP met de Gonshor procedure9 (fig. 2-4) te produceren. De twee-redtop buisjes bloed werden opzij gezet om te stollen.

De algemene doeleinden centrifuge publicatie Gonshor beschreven, de twee 9-rode-top buizen met gestold bloed werden gecentrifugeerd bij 2000 rpm gedurende 10 minuten langs de vier rode-top buizen met plasma voor de tweede rotatie (fig. 3). Het serum werd voorzichtig verwijderd van elke buis met een steriele spuit en samengevoegd in een steriele houder (fig. 5). De containers met PRP (4.5mls), PPP (6.5mls) en serum (2,5 ml) werden bedekt en in de chirurgische operatory samen met een flesje van 10% calciumchloride, steriele Dappen gerechten, 5 ml en 1 ml steriele spuiten (Fig . 6).

ACTIVERING vAN PRP

om de PRP activeren om een ​​bloedplaatjes rijke plasma gel krijgen, 1 ml PRP werd verdeeld in elk van vier Dappen gerechten (fig. 7). 10% calciumchloride aan elk dappenglaasje toegevoegd in een verhouding van 1 CaCl2: 5 PRP volumeprocent (0,2 ml CaCl2: 1 ml PRP). Serum werd daarna toegevoegd aan het gecalcificeerde PRP per dappenglaasje in een verhouding van 1 serum: 2 PRP volumeprocent (0,5 ml serum 1ml PRP). Het complex liet men op kamertemperatuur komen en de tijd voor gelvorming PRP werd opgenomen (Fig. 8). Bovenstaande activeringsproces werd ook bereikt door het aanzuigen van geschikte hoeveelheden verkalkt PRP en serum in een 5mls. injectiespuit. Het geactiveerde complex kan dan worden geleverd via de spuit de sitegerichte. Bij bottransplantaat werd gedaan, autogeen bot, allograft, xenograft of een samengestelde graft werd toegevoegd aan PRP verkalkte, vervolgens werd serum toegevoegd aan een PRP gel in aanwezigheid van het graftmateriaal (figuren 9 & amp., 10) te produceren. De tijd voor gelvorming PRP werd geregistreerd en de PRP gel-transplantaat-complex werd daarna in situ. In alle gevallen waarin resorbeerbare membranen werden gebruikt voor afgifte van groeifactoren in situ cel occlusiviteit en /of geleide weefselregeneratie, werden de membranen ondergedompeld in verkalkte PRP, geactiveerd met serum daarna direct geplaatst in situ tussen bot en zacht weefsel voor PRP gel was gevormd. De tijden voor PRP Gelvorming in situ werden geregistreerd. Wanneer bloedplaatjes arm plasma (PPP) werd als afdichtmiddel voor weefsel werd ook geactiveerd met serum en 10% calciumchloride. Na levering 1 ml PPP een dappenglaasje calciumchloride is in een verhouding van 1 CaCl2 toegevoegd: 2,5 PPP volumeprocent (0,4 ml CaCl2: 1 ml PPP). Serum werd vervolgens in een verhouding van 1 serum toegevoegd: 1 PPP volumeprocent (1,0 ml serum: 1 ml PPP). Het complex liet men bij kamertemperatuur staan ​​gedurende 10 minuten vervolgens gebruikt om de chirurgische incisie lijn en hechtdraad ingangen afdichting (fig. 11). Het werd gedurende 5 minuten in situ ongemoeid gelaten. Dit proces werd ook bereikt door het opzuigen van de respectieve volumes van verkalkte PPP, 2 en serum in een 5 ml spuit en vertrokken voor 10 minuten vóór gebruik te staan.

Resultaten

Het volume van de geconcentreerde PRP verkregen bedroeg gemiddeld 1,1 ml /buis. Dit in vergelijking gunstig af bij results.9 Gonshor's Het totale volume van PRP verkregen uit de 4 gecitreerd buisjes bloed was 4.5mls. Het volume van serum verkregen uit de 2 buizen geklonterd bloed na centrifugeren werd 2,5 ml. Het volume van PPP verkregen was 6,5 ml. Voor de vorming van bloedplaatjes-rijk plasma gel in vitro (fig. 8), het tijdsbereik 5-10 minuten bedroeg. Het bereik was 30-60 seconden in situ. Compleet bloed verwerking duurde ongeveer 30 minuten. PRP gel werd snel gevormd in de aanwezigheid van autograft (fig. 9) en allograft (fig. 10). Een PPP stolsel werd in 10 minuten bij serum gecalcificeerde PPP werd toegevoegd (Fig. 11). Dit werd gebruikt als een autologe weefsel kit voor de chirurgische incisie lijn en hechtdraad toegangspunten.

DISCUSSIE

Fysiologische voordelen van PRP

Met het oog op de fysiologische voordelen van PRP plukken , is het zeer belangrijk dat de groei factoren worden vrijgelaten uit levensvatbaar bloedplaatjes want het is tijdens de handeling van het korrel exocytose dat de bloedplaatjes completeert tertiaire structure.2,3,9 de groeifactor eiwit de tertiaire structuur, met zijn unieke conformatie is de meest biologisch actieve structuur. De moleculaire conformatie maakt het eiwit de actieve plaats passende vormen voor de specifieke substraat zodat katalyse verlopen. Anitua et AL1 zijn een aantal situaties waarin geleid afscheiding van autologe bloedplaatjes producten kunnen genezing en wondheling te bevorderen vermeld. De situaties zijn: kaakchirurgie en bottransplantaten, tandheelkundig implantaat chirurgie, orthopedische chirurgie en bot wederopbouw, gezicht plastische en cosmetische chirurgie, huidzweren, oogchirurgie-retinale hole reparatie, sportgeneeskunde-kraakbeen en pezen reparatie. Het meest algemene gebruik van PRP heden is in de tandheelkunde, 4,5,11,12,15 waarbij verschillende auteurs hebben aangetoond dat de toediening van PRP in verschillende operatieplaatsen snel geprecipiteerd zowel harde als zachte weefselregeneratie en repair.1 , 5-7,15,16 Anderen beweren dat het gebruik van autologe bloedplaatjes kan een positieve invloed op de uitkomst wanneer autografts, transplantaten en xenotransplantaten worden gebruikt voor kaakkam vergroting procedures.15,16

Bone regeneratie vereist de aanwerving , proliferatie en rijping van osteoblasten die zijn afgeleid van mesenchymale cells17,18 en één studie suggereert dat bloedplaatjes vrijgekomen ook de migratie van mesenchymale cells.19 promoten Gonshor9 dat het combineren van de groeifactoren PDGF en TGF is aangetoond botherstel versnellen, 20 bevorderen fibroblast proliferatie, te verhogen weefsel doorbloeding, de snelheid van de vorming van collageen, 21,22 mitose van mesenchymale stamcellen, endotheelcellen, evenals osteoblasten, spelen een belangrijke rol in de snelheid en mate van botvorming.

in een reeks van 20 patiënten die meerdere extracties, werd PRP stolsel in de bussen afgezet op één zijde van de mond terwijl de andere diende als controle. Botbiopsies werden genomen bij winningslocaties tussen de 10 en 16 weken. In de meeste patiënten met PRP klonter, botherstel was uitgebreid en botweefsel werd gesloten met goed georganiseerde trabeculae. Daarentegen in de controlegroep de holte is vooral gevuld met verbindende tissue.1 Via diermodellen sommige auteurs hebben aangetoond dat, net als bij de mens, het toevoegen PRP-stolsel rond opgeruwd titanium implantaten op het moment van implantatie in goats23 en minipigs24 verbeterd zowel kwantitatief als kwalitatief botregeneratie rond de implantaten.

Wat initieert het stolsel?

het is een bekend feit dat fysiologische bloed begint te stollen wanneer het wordt blootgesteld aan collageen vivo. Het feit dat een stuk van collageen verminderde activering tijd is het bewijs dat een passend oppervlak was voor de inleiding van de stolling cascade. De voorlopers en enzymen van het stollingssysteem moet daarom in het serum wordt daarbij aangewende inleiding van de stollingscascade zijn. Trombine is gewoonlijk niet in serum na stolling voltooid omdat de productie wordt gestopt door antitrombine III remming factoren 1XA, Xa, XIa en XIIa met behulp van de cofactor heparine en wat overblijft wordt gecomplexeerd met trombomoduline voor fibrinolyse de behulp van proteïne C, proteïne S, weefselplasminogeenactivator (tPA), urokinase plasminogen activator (uPA) plasminogeen en plasmine.

Onderzoek moet worden gedaan op de kwantificering van de stolling precursor componenten en enzymen van serum en hun stabiliteit onder verschillende omstandigheden. Verdere studies moeten ook worden uitgevoerd op de stabiliteit van groeifactoren nadat ze zijn vrijgemaakt uit plaatjes.

IN SITU RESULTATEN

De resultaten in situ resultaten zijn vergelijkbaar met resultaten die Anitua et AL1 wanneer ze geïrrigeerd peri-implantaat oppervlakken met verkalkte PRP onmiddellijk na implantatie gemengd met geëxtrudeerde supernatans van een teruggetrokken stollen.

in vitro RESULTATEN

De langere stollingstijden verkregen in vitro kan een indicatie zijn dat de concentraties van stolling precursoren en enzymen kunnen relatief laag serum en het kost tijd om de reacties te ontwikkelen. Echter, zodra activering werd ingeleid volgende stolling ging snel. Dit is in overeenstemming met de autocriene /paracriene aard van intercellulaire communicatie via chemische mediatoren bij bloedplaatjesactivatie. Anitua et AL1 stelt dat de toediening van geactiveerde bloedplaatjes in fibrinestolsel of fibrinelijm biedt een klevende ondersteuning die afscheiding kan beperken tot een gekozen locatie, en de presentatie van groeifactoren verbonden aan bloedplaatjes en /of fibrine kan leiden tot verhoogde activiteit ten opzichte van recombinante eiwitten . Uitgebreid in vitro activatie tijden kan voordelig zijn wanneer autogeen bot, transplantaten en xenotransplantaten worden gemengd met PRP voor plaatsing in situ nok augmentatie transplantaten, rand onderhoud transplantaten, sinus elevatie transplantaten, reparatie van schneiderian membraan en snelle heling van weke delen en rijping.

Conclusie

de procedure hier gepresenteerde laat zien autoloog trombine in het serum van de patiënt kan worden gebruikt om plaatjes te activeren. Het moet een veilig alternatief voor therapeutisch gebruik ervan. De beschikbaarheid van autologe PRPgel met groeifactor afgifte en autologe fibrinelijm als afdichtmiddel voor weefsel toont dat autoloog trombine bij de patiënten serum kan effectief activeren bloedplaatjes en daardoor een alternatief voor het stimuleren van weefselregeneratie, reparatie en rijping in de tandheelkunde en geneeskunde blijven bieden .

Let op

* De groei factor niveaus, bloedplaatjes en activering tijden zullen variëren van persoon tot persoon, alsmede met de leeftijd en de gezondheidstoestand.

* De vergrijzing van serum en PRP invloed kunnen activeringstijden omdat de eiwitten zeer labiel zijn in vitro.

* Wanneer deze procedure wordt gebruikt, moet voorkomen worden gezorgd dat een maximaal steriele omgeving is voorzien bloedafname, PRP verwerking en activering.

Dr. Smith is in de eigen praktijk voor 25 jaar in New Westminster, BC. In 2004, vond hij een patiënt-specifieke procedure voor autoloog trombine-activering van bloedplaatjes in bloedplaatjes rijk plasma (PRP).

Oral Health is ingenomen met deze originele artikel.
< p> Dankwoord

ik wil graag bedanken Dr. Aron Gonshor van Montreal, Dr. Ross MacGillivray, Dr. Ed Pryzdial en Dr. Dana Devine van het Centrum voor Blood Research, Universiteit van British Columbia, voor hun onschatbare waarde discussies.

Disclosure

de auteur beweert geen financieel belang in een bedrijf of een van de in dit artikel genoemde producten. hebben

Referenties

1.Eduardo Anitua, Isabel Andia, Bruno Ardanza, Paquita Nurden (3,4), Alan t. Nurden. Autologe bloedplaatjes als eiwitbron voor genezing en weefselregeneratie. Journal of trombose en hemostase 2004; 91: 4-15

2.Rendu F, Brohard-Bohn B. De bloedplaatjes vrijkomen reactie:. Korrels 'bestanddelen, secretie en functie, bloedplaatjes 2001; . 12: 261-73

3.Reed GL. Bloedplaatjes secretie. In Bloedplaatjes (red: AD Michelson) ,. Elsevier Science, San Diego, 2002, pp181-95.

4.Marx RE, Carlson ER, Eichstaedt RM, Schimmele Sr, Strauss JE, Georgeff KR. Bloedplaatjes-rijk plasma. Groeifactor verbetering voor bottransplantaten. Oral Surg mondelinge med mondelinge Pathol 1998; 85:. 638-646

5.Whitman DH, Berry rl, Green DM. Bloedplaatjes gel: een autologe alternatief voor fibrinelijm met toepassingen in de kaakchirurgie. Journal Maxillofac Surg 1997; 55: 1294-9

6.Marx RE, bloedplaatjes-rijk plasma. Een bron van meerdere autologe groeifactoren voor bottransplantaten. In: Lynch Se, Genco RJ, Marx RE (eds). Tissue Engineering: toepassingen in Kaakchirurgie en Parodontologie. Chicago: Quintessence, 1999:. 71-82

7.Snchez Ar, Sheridan PJ, Kupp LI. Is bloedplaatjes-rijk plasma de perfecte versterking factor? Een actueel overzicht. Int J Oral Maxillofac Implants 2003; 18:. 93-103

8.Zimmermann R, R Jakubietz, Strasser E, et al. Verschillende technieken om bloedplaatjescomponenten verkrijgen als een bron van groeifactoren voor lokale toepassing. Transfusion 2001; 41: 1217-1224

9.Aron Gonshor, BSc, PhD, DDS, FRCD (c) * techniek voor de productie Bloedplaatjes-Rich Plasma en bloedplaatjes concentraat. Achtergrond en Process. De interne Journal of Parodontologie en restauratieve tandheelkunde. Volume 22, Number 6, 2002.

10.Sonneleitner D, Huemer P, Sullivan Dy. Een vereenvoudigde methode voor de productie van bloedplaatjes-rijk plasma en bloedplaatjes concentraat voor intra-orale bot enten technieken: een technische noot. Int J Oral Maxillofac Implants 2000; 15:. 879-882 ​​

11.Anitua E. plasma rijk aan groeifactoren: Voorlopige resultaten van het gebruik in de voorbereiding van toekomstige locaties voor implantaten. Int J Oral Maxillofac Implants 1999; 14:. 529-535

12.Lazada JL, Caplanis N, Proussaefs P, Willardsen J, KAMMEYER G. Bloedplaatjes-rijk plasma toepassing sinus graft chirurgie: Part 1-Achtergrond en verwerkingstechnieken. J Oral Implantol 2001: 27: 38-42

13.Landesberg R, Roy M, Glickman RS.. Kwantificering van groeifactor niveaus middel van een vereenvoudigde werkwijze voor bloedplaatjes-rijk plasma gelbereiding. J Oral Maxillofac Surg 2000; 58:. 297-300

14.Landesberg R, Moses M, Karpatkin M. Risico van het gebruik van bloedplaatjes-rijk plasma gel. J Oral Maxillofac Surg 1998; 56: 1116-7

15.Robert E. Marx en Arun K. Garg.. Tandheelkundige en craniofaciale Toepassingen van Bloedplaatjes-Rich Plasma. Quintessence Publishing Co. Inc. 2005.

16.Tischler M. Bloedplaatjes rijk plasma. Het gebruik van autologe groeifactoren bot en zacht weefsel enten verbeteren. NY State Dent J 2002; 68:. 22-4

17.Ducy P, Schinke T, Karsenty G. De osteoblasten: een geavanceerde fibroblast onder centraal toezicht. Science 2000; 289:. 1501-4

18.Harada S-I, Rodan GA. Controle van osteoblasenfunctie en regulering van botmassa. Nature 2003; 423:. 349-55

19.Oprea Wij, Karp JM, Hosseini MM, et al, Effect van bloedplaatjes releasate op het bot cel migratie en rekrutering in vitro.. J Craniofac Surg 2003; 14:. 292-300

20.Tang YQ, Yeaman MR, Selsted Me. Antimicrobiële peptiden uit menselijke bloedplaatjes. Infect Immun 2002; 70:. 6515-7

21.Burnstock G. Purinerge signalering en vasculaire proliferatie en celdood. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2002; 10:.. 271-85

22.Schober een, Manka D, von Hundelshausen P, e.a., Afzetting van trombocyten Rantes triggering monocyt rekrutering vereist P-selectine en is betrokken bij neointima vorming na arterieel letsel. Circulation 2002; 106:. 1523-9

23.Anitua E, Andia Ortiz I. BTI implantaat systeem: De eerste implantaat systeem met een bioactieve oppervlak. Maxillaries 2001; 39:.. 2-7

24.Zechner W, Tangl S, Tepper G, et al, Invloed van bloedplaatjes-rijk plasma op ossaal genezing van tandheelkundige implantaten: een histologische en histomorfometrische studie in minivarkens . Int J Oral Maxillofac Implants 2003; 18: 15-22
.